ASTM F2605-08
采用体积排阻色谱法和多角度光散射检测法 (SEC-MALS) 测定海藻酸钠摩尔质量的标准试验方法

Standard Test Method for Determining the Molar Mass of Sodium Alginate by Size Exclusion Chromatography with Multi-angle Light Scattering Detection (SEC-MALS)

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标准号

ASTM F2605-08

发布

2008年

发布单位

美国材料与试验协会

替代标准

ASTM F2605-08e1

当前最新

ASTM F2605-16

 

 

适用范围

海藻酸盐的组成和顺序结构以及摩尔质量和摩尔质量分布决定了海藻酸盐在应用中的功能。例如，藻酸盐的胶凝特性高度依赖于聚合物的组成和摩尔质量。光散射是可用于测定绝对摩尔质量和结构的极少数方法之一，并且它适用于任何方法中最广泛的摩尔质量范围。将光散射检测与根据大小对分子进行分类的尺寸排阻色谱 (SEC) 相结合，能够分析多分散样品，并获得有关支化和分子构象的信息。这意味着对于大多数样品，可以获得摩尔质量和尺寸的数均值和质量平均值。此外，人们还能够计算摩尔质量和尺寸的分布。多角度激光散射 (MALS) 是一种在一系列不同角度上同时进行测量的技术。 MALS 检测可用于获取分子尺寸信息，因为该参数由散射光的角度变化决定。原则上，摩尔质量可以通过检测单个低角度（LALLS）的散射光来确定。然而，与 LALLS 相比，MALS 的优点是：(1) 在较大角度时噪音更少，(2) 通过在多个角度进行检测大大提高了测量精度，(3) 检测角度变化的能力允许确定尺寸、支化、聚集和分子构象。尺寸排阻色谱法使用的柱子通常填充有包含均匀孔网络的聚合物颗粒，溶质和溶剂分子可以扩散到这些孔中。在孔中时，分子被有效地捕获并从流动相流中去除。在孔中的平均停留时间取决于溶质分子的大小。大于填料平均孔径的分子被排除，几乎没有保留；这些首先在柱的空隙体积中被洗脱。可以穿透孔的分子将具有更大的可用于扩散的体积，它们将根据其分子大小而被保留，较小的分子最后洗脱。对于聚电解质，建议针对洗脱缓冲液进行透析，以消除光散射摩尔质量测定中的唐南型伪影 (1, 2)。然而，在本方法中，光散射检测之前的尺寸排阻色谱步骤是透析步骤的有效替代。样品在含有大量过量洗脱缓冲液的 SEC 柱上分离 30 至 40 分钟，因此当样品到达 MALS 检测器时与洗脱缓冲液完全平衡。
1.1 本测试方法涵盖钠摩尔质量的测定海藻酸盐通过多角度激光散射检测 (SEC-MALS) 尺寸排阻色谱法用于生物医学和制药应用以及组织工程医疗产品 (TEMP)。海藻酸盐表征指南已发布为 Guide F 2064。
1.2 TEMP 中使用的海藻酸盐应进行充分表征，包括摩尔质量和多分散性（摩尔质量分布），以确保最终产品的均匀性和正确的功能。该测试方法将帮助最终用户为其特定应用选择正确的藻酸盐。海藻酸盐可用作 TEMP 的支架或基质材料，用于细胞和组织封装应用以及药物递送制剂。 1.3

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