T/GZCX 018-2022
刺梨及其制品中总黄酮含量的测定

Determination of total flavonoids content in Rosa roxburghii and its products


标准号
T/GZCX 018-2022
发布
2022年
发布单位
中国团体标准
当前最新
T/GZCX 018-2022
 
 
适用范围
4  方法原理  黄酮类化合物是具有苯并吡喃环结构的一类天然化合物的总称。溶于乙醇的黄酮类化合物在弱碱性条件下,与铝盐络合反应后生成有色物质,可在420 nm波长附近产生最大吸收。在一定浓度范围内,其吸光度与黄酮类化合物的含量成正比。与芦丁标准品比较,可定量测定黄酮类化合物的含量。 5  试剂和材料 5.1  试剂 除另有规定外,仅使用分析纯试剂和GB/T 6682规定的一级水。 5.1.1  芦丁(C27H30O16,CAS号:153-18-4)标准品,纯度 ≥ 98.0%。 5.1.2  无水乙醇(C2H6O)。  5.1.3  硝酸铝[Al.(NO3)3·9H2O]。 5.1.4  醋酸钾(C2H3KO2)。 5.2  试剂配制 5.2.1  芦丁对照品溶液(1 mg/mL):精密称取50 mg(精确至0.1 mg)芦丁标准品,加少量无水乙醇溶解,转移至50 mL容量瓶中,加无水乙醇定容至刻度,摇匀。  5.2.2  硝酸铝溶液(100 g/L):称取Al(NO3)3·9(H2O) 17.60 g(精确至0.01 g),加少量水溶解,转移至100 mL容量瓶中,加水定容至刻度,摇匀。 5.2.3  醋酸钾溶液(98 g/L):称取C2H3KO2 9.80 g(精确至 0.01 g),加少量水溶解,转移至100 mL容量瓶中,加水定容至刻度,摇匀。 6  仪器和设备 6.1  紫外分光光度计。 6.2  高速破壁机。  6.3  分析天平,感量为0.0001 g。 6.4  超声波提取器。 6.5  离心机,4000 r/min。 6.6  组织捣碎机。 7  分析步骤 7.1  试样制备 将刺梨鲜果(3.1)刺梨鲜果去皮、去籽,组织捣碎机打浆,混合均匀,备用;去除刺梨果干(3.2)和刺梨果脯(3.3)中可见杂质,用高速破壁机粉碎,将其制成粉状,备用;刺梨冻干粉(3.4 )和刺梨喷干粉(3.5)研磨均匀备用。 7.2  试样提取 7.2.1  固态试样: 取7.1样品0.5 ~ 2 g,精密称定(精确到0.0001 g),置烘干恒重具塞锥形瓶中,加无水乙醇50 mL,称定重量,置于超声波提取器中超声处理1小时(每20分钟摇匀溶液一次),放冷,再称定重量,用无水乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,续滤液离心10分钟,取上清液,即得。 7.2.2  液态试样: 刺梨原汁(3.6)、刺梨浓缩汁(3.7)等液体样品,精密量取样品1~10 mL,置烘干恒重具塞锥形瓶中,加无水乙醇50 mL,称定重量,置于超声波提取器中超声处理1小时(每20分钟摇匀溶液一次),放冷,再称定重量,用无水乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,续滤液离心10分钟,取上清,即得。 7.3  标准工作曲线 准确量取芦丁对照品溶液(5.2.1)0.0 mL、1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL分别置于50 mL容量瓶中,依次加入硝酸铝溶液(5.2.2)1 mL,醋酸钾溶液(5.2.3)1 mL,摇匀后加水至刻度。静置1小时后,在420 nm处测定吸光度。以50 mL溶液中芦丁质量(mg)为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。 7.4  空白试验 与试样的测定平行进行,取相同量的所有试剂,采用相同的分析步骤,但不添加试样。 7.5  试样的测定 准确量取提取液(7.2)1.0 mL置于50 mL容量瓶中,依次加入硝酸铝溶液(5.2.2)1 mL,醋酸钾溶液(5.2.3)1 mL,摇匀后加水至刻度。静置1小时后,在420 nm处测定吸光度。 若样品总黄酮含量较高(吸光度不在0.1~0.8之间),可适当稀释后再进行分析测定。 8  分析结果的表述  8.1  刺梨鲜果、刺梨干果等固态试样 试样中总黄酮含量(以芦丁计)以百分含量(%)表示,按公式(1)进行计算。 x =   ……………………(1) 式中:  x───试样中总黄酮含量(以芦丁计);  m───由标准曲线查出的样品中芦丁质量,单位为毫克(mg);  M───试样质量,单位为克(g);  d───样品稀释倍数;   计算结果保留小数点后两位。   8.2  刺梨原汁、刺梨浓缩汁等液态试样 样品中总黄酮含量(以芦丁计)以百分含量(%)表示,按式(2)计算: x =   ……………………(2) 式中:  x───试样中总黄酮含量(以芦丁计);  m───由标准曲线查出的样品中芦丁质量,单位为毫克(mg);  v───试样体积,单位为毫升(mL);  d───样品稀释倍数;   计算结果保留小数点后两位。  9  精密度 在重复条件下,获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的10%。

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