微量基因组DNA提取试剂盒说明
本试剂盒提供了高效、快速从各种微量生物样本中纯化得到较高浓度基因组DNA的方法，例如：微量血液、细胞、动物组织、干燥血迹、临床棉签、毛囊等。采用本公司特有的DNA-only硅胶膜离心柱和配方，搭配Foregene Protease，可以在20-80分钟提取到较高浓度、高质量的基因组DNA。专门设计的微小纯化柱结合基因组DNA，可用微量（15μl）洗脱液洗脱DNA，提高获得的基因组DNA的浓度，便于下游检测或实验。试剂盒一次可处理一个或多个样品，且纯化过程不需要用到酚、氯仿等有机物抽提以及耗时的异丙醇或乙醇沉淀，操作简捷省时。
产品特点
无RNA酶污染：无需额外添加RNA酶即可去除基因组DNA中的RNA，避免实验室遭受外源RNA酶污染。
速度快：Foregene Protease具有比同类蛋白酶更高的活性，消化组织样本速度快；操作简单，基因组DNA提取操作在20-80分钟内即可完成。
方 便：离心操作均在常温，无需4℃低温离心或乙醇沉淀DNA。
安 全：无需有机试剂抽提。
质量高：提取获得的基因组DNA片段大、无RNA、无RNA酶、离子含量极低，能满足各种实验的要求。
微量洗脱体系：可以提高基因组DNA浓度，便于下游检测或实验。
一、从微量抗凝血液中提取基因组DNA
使用前请先在Buffer WB中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。
1. 取1-100μl抗凝血液到1.5ml离心管中。
2. 不足100μl的血液样本加Buffer ST1补足到100μl。
3. 加入10μl Foregene Protease，涡旋混匀。
4. 加入100μl Buffer ST2，轻轻颠倒混匀，简短离心以去除管盖及内壁的液滴。
5. 将离心管放置于65℃金属浴或水浴中10min，每间隔3min轻摇混匀一次。
6. 将混合液全部转移至离心柱中，12,000rpm(~13,400×g) 离心1min，弃掉收集管中的废液。
7. 将离心柱放回收集管中，向离心柱中加入500μl Buffer PW，12,000rpm(~13,400×g)离心1min，弃掉收集管中的废液。
8. 将离心柱放回收集管中，向离心柱中加入700μl Buffer WB，12,000rpm(~13,400×g)离心1min，弃掉收集管中的废液。
9. 重复步骤8一次。
10. 将离心柱放回收集管中，12,000rpm(~13,400×g) 空管离心1min。
11. 将离心柱转移至新的1.5ml 离心管中，向膜中央悬空滴加15-100μl 已于65℃预热的Buffer EB，室温放置5min，12,000rpm(~13,400×g) 离心1min。
注意：Buffer EB的体积不应少于15μl，在推荐洗脱体积范围内，适当增加Buffer EB体积，可提高DNA得率。如果希望提高DNA的浓度，可将第1次离心得到的溶液重新加回离心柱中，12,000rpm (~13,400×g) 离心1min。
二、从漱口水中提取基因组DNA
使用前请先在Buffer WB中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。
1. 在50ml无菌管中添加10-20ml漱口水样品，1800×g离心5min，将上清小心倒掉或用移液器小心吸除上清液。
2. 向沉淀中加入180μl Buffer ST1，重悬沉淀，将全部悬液转移至1.5ml离心管中。
3. 加入20μl Foregene Protease，涡旋混匀。瞬时离心以收集附着在管盖及内壁的液体。
4. 将离心管放置于65℃金属浴或水浴中30-60 min，其间每间隔15min涡旋混匀一次（或用手指用力弹击离心管底部数次）以帮助细胞酶解。
5. 加入200μl Buffer ST2，涡旋混匀，瞬时离心以收集附着在管盖及内壁的液体。
6. 将离心管放置于65℃金属浴或水浴中10min，其间每间隔3min涡旋混匀一次。
7. 将所得混合液全部转移至离心柱中，12,000rpm(~13,400×g) 离心1min，弃掉收集管中的废液。
8. 将离心柱放回收集管中，向离心柱中加入500μl Buffer PW，12,000rpm(~13,400×g)离心1min，弃掉收集管中的废液。
9. 将离心柱放回收集管中，向离心柱中加入700μl Buffer WB，12,000rpm(~13,400×g)离心1min，弃掉收集管中的废液。
10. 重复步骤9一次。
11. 将离心柱放回收集管中，12,000rpm(~13,400×g) 空管离心1min。
12. 将离心柱转移至新的1.5ml 离心管中，向膜中央悬空滴加15-100μl 已于65℃预热的Buffer EB，室温放置5min，12,000rpm(~13,400×g) 离心1min。
注意：Buffer EB的体积不应少于15μl，在推荐洗脱体积范围内，适当增加Buffer EB体积，可提高DNA得率。如果希望提高DNA的浓度，可将第1次离心得到的溶液重新加回离心柱中，12,000rpm (~13,400×g) 离心1min。
三、从毛囊中提取基因组DNA
使用前请先在Buffer WB中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。需提前准备1M DTT溶液。
1. 取1根含毛囊的毛发：在1.5ml离心管中加入250μl Buffer ST1，20μl Foregene Protease，20μl 1M DTT，混匀。从毛发根部毛囊处取1cm长的一段，与上述溶液涡旋混匀。
2.
将离心管放置于65℃金属浴或水浴中1hr，其间每间隔15min涡旋混匀一次；或者置于水浴振荡仪中消化，消化至毛发断裂为小段或发生卷曲即可。瞬时离心以收集附着在管壁及管盖的液体。
注意：裂解时间根据样本不同有所差异，一般毛发需要40-60min。羽茎样本不会完全酶解，对于未酶解完全的羽茎样本，可以直接以12,000rpm(~13,400×g)离心5min，取上清液进行后续实验。
3. 加入300μl Buffer ST2，涡旋混匀，瞬时离心以收集附着在管壁及管盖的液体。
4. 将离心管放置于65℃金属浴或水浴中10min，每间隔3min涡旋混匀一次。
5. 将所得混合液全部转移至离心柱中，12,000rpm(~13,400×g) 离心1min，弃掉收集管中的废液。
6. 将离心柱放回收集管中，向离心柱中加入500μl Buffer PW，12,000rpm(~13,400×g)离心1min，弃掉收集管中的废液。
7. 将离心柱放回收集管中，向离心柱中加入700μl Buffer WB，12,000rpm(~13,400×g)离心1min，弃掉收集管中的废液。
8. 重复步骤7一次。
9. 将离心柱放回收集管中，12,000rpm(~13,400×g) 空管离心1min。
10. 将离心柱转移至新的1.5ml 离心管中，向膜中央悬空滴加15-100μl 已于65℃预热的Buffer EB，室温放置5min，12,000rpm(~13,400×g) 离心1min。
注意：Buffer EB的体积不应少于15μl，在推荐洗脱体积范围内，适当增加Buffer EB体积，可提高DNA得率。如果希望提高DNA的浓度，可将第1次离心得到的溶液重新加回离心柱中，12,000rpm (~13,400×g) 离心1min。
