苄星青霉素的检查方法
酸碱度取本品50mg,加水10m制成混悬液,依法测定(通则0631),pH值应为5.0~7.5。有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。临用新制磷酸盐缓冲液取磷酸二氢钾6.8g与磷酸氢二钾14g,加水溶解并稀释至1000ml。供试品溶液取本品约70mg,精密称定,置50ml量瓶中,加乙腈10ml振摇使均匀分散后,加甲醇10m1充分振摇使溶解,立即用磷酸盐缓冲液稀释至刻度,摇匀。对照溶液精密量取供试品溶液1ml,置100ml量瓶中,用磷酸盐缓冲液稀释至刻度,摇匀系统适用性溶液取本品70mg,置50ml量瓶中,加乙腈10ml和甲醇5ml使溶解,加0.1mol/L盐酸溶液2.0m,放置10分钟,加0.1mo/L氢氧化钠溶液2.0ml中和,用0.05mol/L磷酸盐缓冲液(pH6.0)稀释至刻度,摇匀。色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH值至3.1)为流动相A,甲醇为流动相B,按下表进行线性梯度洗脱;柱温为40℃;检测波长为220nm;进样体积20时间(分钟)流动相A(%)流动相B(%)555系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,青霉素峰的保留时间约20分钟,二苄基乙二胺峰与相邻杂质峰间的分离度和青霉素峰与相邻杂质峰间的分离度均应符合要求。测定法精密量取供试品溶液与对照溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,单个杂质峰面积不得大于对照溶液两主峰面积和的2倍(2.0%),各杂质峰面积的和不得大于对照溶液两主峰面积和的3.5倍(3.5%),小于对照溶液两主峰面积和0.05倍的峰忽略不计。水分取本品,照水分测定法(通则0832第一法1)测定,含水分应为5.0%~8.0%抽针试验取本品1.0g,加水4ml,摇匀,用装有5号针头的注射器抽取,应能顺利通过,不得阻塞可见异物取制剂项下的最大规格量5份,分别加N-二甲基甲酰胺适量溶解后,依法检查(通则0904),应符合规定。(供无菌分装用)细菌内毒素取本品,依法检查(通则1143),每1000单位青霉素中含内毒素的量应小于0.25EU。(供注射用)无菌取本品,用适宜溶剂使分散均匀,加青霉素酶灭活后,依法检查(通则1101),应符合规定。(供无菌分装用)
