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cGMP检测试剂盒原理及使用说明

2020.6.29

cGMP(鸟苷-3´,5´-环化一磷酸,环磷酸鸟苷)是一种环状核苷酸,以微量存在于动植物细胞和微生物中。与CAMP类似,有人称其为细胞内的第二信使,而称激素为“第一信使”。cGMP由鸟苷酸环化酶(GC)产生,而被磷酸二酯酶降解,因此激活鸟苷酸环化酶或者抑制磷酸二酯酶可以提高细胞内cGMP的含量。研究发现,cGMP特异性磷酸二酯酶的抑制剂可用于人类疾病的治疗。如cGMP特异性磷酸二酯酶类型可用于治疗ED等疾病。因此为筛选出腺苷酸环化酶激活剂或磷酸二酯酶抑制剂,需要一个高敏感度、特异性的、可重复的方案用于检测cGMP的含量。

目前商业化提供的一些cGMP检测试剂盒主要应用ELISA的方案,使用的是非亲和纯化的cGMP抗体,因此特异性不是很理想; 另外在一些组织中,cGMP的含量很低,使用传统的显色或发光方法,最终检测的灵敏度也不是很理想。我们向您推荐BioVision的cGMP检测试 剂盒,该试剂盒提供了一个灵敏的、通过直接竞争酶联免疫法灵敏的检测生物样本内cGMP水平的方案。首先使用了经亲和纯化的cGMP抗体保证了检测的特异 性,另外在最后显色时使用了ZL技术的乙酰化程序显著地提高显色反应的灵敏度。

BioVision的cGMP检测试剂盒—cGMP Activity Assay Kit采用重组 Protein G包埋的96孔酶标板以高效锚定cGMP多克隆抗体分子,试剂盒内提供的cGMP-HRP偶联物直接与待测样本内cGMP竞争性的结合到酶标板的cGMP 抗体上。孵育并清洗后,结合到酶标板上的cGMP-HRP偶联物数量可以很方便的通过HRP显色底物等试剂在OD450nm处读取。这样OD450 nm的数值与样本内cGMP的含量呈负相关。

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cGMP检测试剂盒内包含了:cGMP检测缓冲液、cGMP标准品、中和缓冲液、乙酰化试剂A、乙酰化试剂B、亲和纯化兔源抗cGMP抗体、 cGMP- HRP、HRP显色剂、Protein G包被的酶标板等9种试剂和配套产品,可用于100次分析。由于试剂盒提供了一种新颖的乙酰化程序显著地提高显色反应的灵敏度,其检测灵敏度可达到0.1-10 pmol/5 μl (或者0.02-2 μM)的cGMP。另外,Biovision还单独提供试剂盒内的cGMP抗体(货号为#3568-100)。


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