巯基被氧化的原理
巯基是许多蛋白质和酶活性部位的必需基团，极易被氧化，形成分子内或分子间的二硫键，导致酶活性丧失。
巯基又称氢硫基或硫醇基，是由一个硫原子和一个氢原子相连组成的负一价官能团，化学式为—SH。巯基端连接不同的基团，有机物所属的类别不同，如硫醇（R—SH）、硫酚（Ar—SH）。
巯基与二硫键的相互转化
体内含有巯基的功能蛋白主要是通过巯基与二硫键的相互转化来实现其功能的。在体内和人工条件下，二者之间实现着互相转化的过程。在体内自然状态下，二硫键与巯基的相互转化主要是通过巯基／二硫键氧化还原酶的催化而实现的。
天然二硫键的形成是许多蛋白正确折叠中的限速步骤，在稳定蛋白质构象和保持蛋白质活性方面起重要作用。在体外人工环境下，从氨基酸水平来看，半胱氨酸在碱性溶液中易被氧化形成二硫键，生成胱氨酸。氧化和还原剂均可打开二硫键。
在研究蛋白质结构时，氧化剂过甲酸可定量拆开二硫键，生成相应磺酸。还原剂如巯基乙醇、巯基乙酸也能拆开二硫键，生成相应巯基化合物。由于半胱氨酸中巯基很不稳定，极易氧化，因此利用还原剂拆开二硫键时，往往进一步用碘乙酰胺、氯化苄、N-乙基丁烯二亚酰胺和对氯汞苯甲酸等试剂与巯基作用，将其保护起来，防止其重新氧化。
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