蛋白染色液说明书
储存条件
常温贮存，开封后一年有效。如4℃贮存，会有结晶形成，37℃温浴融化后可继续使用。
● 产品简介
FastBlue蛋白染色液是以考马斯亮蓝G-250为主要成分，采用新配方配置而成。可用于SDS-PAGE或非变性PAGE胶（native gel）的快速染色。
特点：方便快捷-不用漂洗，不用加热，不用脱色，不用固定，条带2分钟可见。
灵敏度高-检测下限10ng蛋白
兼容性好-适用于变性和非变性胶以及质谱分析
绿色环保-不含甲醇，冰醋酸
● 用前必读：
1 使用前如发现瓶中有少许沉淀，请混匀后使用。
2以下“使用方法”是针对0.75mm厚度，10×10cm凝胶染色程序。
● 使用方法：
1. 将电泳后的PAGE胶取下放入塑料容器中，用适量蒸馏水漂洗一下。
2. 弃蒸馏水，加入适量染色液（以刚刚覆盖过胶面为适），摇床上常温摇动，根据下表确定染色时间。
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待检测蛋白量 |
染色时间 |
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＞1 μg |
2分钟 |
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100ng-1μg |
10分钟 |
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10ng-100ng |
60分钟 |
3. 观察记录结果。
● 附：质谱处理程序
1. 切下待检蛋白条带置于1.5ml离心管中。
2. 加入1ml 30%乙醇或30%丙酮（也可用30%醋酸，但会导致蛋白N端酰基化）。
3. 处理30分钟。
4. 重复步骤2，3直到去除所有染料。一般处理2-3次既能完全去除染料。
5. 质谱分析。
● 注意事项：
1. 使用方法中的各种参数仅针对面积8×10cm或10×10cm，厚度0.75mm的凝胶，如果使用更大面积或更厚的凝胶，请加入更多的染色液并延长染色的时间。
2. 常规染色所需的漂洗，固定，脱色步骤都无必要。
3. 本染色液可以重复利用1-2次，敏感性会有轻微下降，请延长染色时间。
4. 本染色液有轻微腐蚀性，请带手套操作。使用后，请盖好瓶盖，常温密封保存。
● 问题解答：
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Q1 FastBlue染胶的最佳温度是多少？ |
A1 为达到最佳的染色效果，推荐常温（20-25℃）染色。 |
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Q2 FastBlue溶液需要低温贮存吗？ |
A2 Fastblue不需要低温贮存，常温贮存（20-25℃）即可。4-8℃贮存，FastBlue会有结晶生产，37℃温浴融化后可继续使用。 |
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Q3 FastBlue的染色原理是什么？ |
A3 FastBlue染色原理与经典考马斯亮蓝G250染色原理相同（与蛋白质中碱性氨基酸结合），优点是更加快速和更高的灵敏度。 |
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Q4 FastBlue染色后，凝胶可以用蒸馏水保存吗？ |
A4 可以，蒸馏水保存最为简单，也可以保存在稀释的冰醋酸中。 |
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Q5 FastBlue染色后的凝胶能做质谱分析吗？ |
A5 可以。请参阅“质谱处理程序” |
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Q6 FastBlue染色的凝胶能做Weatern Blot吗？ |
A6 不可以。蛋白的染色是不可逆的，染色的凝胶不能用作下游的转膜操作。 |
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Q7 Fastblue能重复使用吗？ |
A7 FastBlue可以重复使用2-3次，但灵敏度有所下降，可以通过延长染色时间来弥补。 |
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Q8 为什么凝胶过夜染色后条带出现涂抹状拖尾？ |
A8 FastBlue过夜染色不会对凝胶过度染色。出现抹涂状拖尾原因是上样量太大，因为FastBlue染色灵敏度较高。另外，分子量较小的蛋白在过夜染色中会有扩散现象，我们推荐染色最好在60分钟内完成。 |
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Q9 FastBlue有固定凝胶的作用吗？ |
A9 FastBlue是水系溶液，没有固定凝胶的作用。然而，由于染色会在60分钟内完成，染色前无需对凝胶进行固定。 |
