用T-wave离子淌度质谱鉴定猪肌肉中多位点分子离子（四）
在图4中，显示了UPLC HDMSE实验生成的常规MS谱图。在m/z 157和m/z 166处，清楚显示环丙沙星存在两个小的双电荷离子，表明环丙沙星确实形成了一种双电荷物质。使用离子淌度能够实现分离并确认该小分子形成了双电荷物质。双电荷物质的形成与否，取决于使用的MS参数，尤其是锥孔电压。如果锥孔电压过高，则无法观察到双电荷物质，仅能观察到[M+H]+。
所得数据表明：应当仔细考虑方法开发和所选的分析方法，因为促进剂的比例和形成会根据洗脱液流速、毛细管电压、锥孔电压和基质的不同而发生变化。如果选择了MRM方法，则需要考虑使用的实验条件和所选择的具体质谱通道。实验数据表明：选择的MRM离子对如果不一致，容易在实验室内和不同实验室间产生偏差，阐述了保持这些化合物可重现性结果，遇到的挑战。离子淌度是一种可用于方法开发的强大工具，能够确保方法的可靠性并获得一致结果。
除了更加具体和可靠的方法开发，不同组分的不同漂移时间，可作为另一个鉴别条件。本应用纪要介绍了可用作环丙沙星鉴定条件的保留时间、母离子精确质量数、碎片离子精确质量数和两个漂移时间。
除了利用离子淌度获得一个新的鉴定条件，还可将离子淌度产生的正交分离用于谱图清理。漂移时间与保留时间变化图（图8A）显示了离子强度，用白色像素表示。基质离子的存在范围用连续的白色表示。更大强度的分析物和基质组分由更明显的白点表示。但是由于基质产生了大量的离子强度，所以很难观察到低浓度的目标分析物。在图8B中，从猪基质中提取出了环丙沙星促进剂。根据使用离子淌度所得到的清晰、选择性的分离，可产生单一组分的MS及其碎片离子谱图。在这些条件下，猪基质中的酸性位点促进剂与碱性位点促进剂的比例测定为5:1。这受到了毛细管电压、锥孔电压、电极位置、流速和基质的影响。在注射实验中，可以改变酸/碱促进剂的比例，甚至可改变含量最高的促进剂。
图9和10显示了环丙沙星、诺氟沙星和二氟沙星促进剂的到达时间分布以及分别使用氮气和二氧化碳作为缓冲气体时得到的峰间分离度计算结果。虽然两种气体都获得了可接受的分离度，但是峰间的Rs值大于1.5才可视为完全分离。先前的研究认为：交替使用这两种缓冲气体，可增加离子淌度的分离度10-14。
