用于脑脊液中多种β淀粉样肽的SPE/LC/MS/MS定量测定方法 三
线性、准确度和精确度
对每种肽均使用了N15标记型内标。对于0.1-10ng/mL人工脑脊液+5%大鼠血浆的等分样本，三种β淀粉样肽的标准曲线均呈线性。β淀粉样1-38肽的典型标准曲线如图5所示。淀粉样肽的基线水平根据同时使用过量加标的人脑脊液和“人工脑脊液+5%大鼠血浆”而得到的两条标准曲线进行定量分析，基线水平的计算值没有统计学意义上的差异。选择人工脑脊液是因为它的价格不贵，而且是一种比较易得的基质。从3种人脑脊液和1种猴脑脊液萃取得到的β淀粉样1-42肽的基线水平如图6所示。所有3种β淀粉样肽的基线水平测定值的统计结果如表2所示。
用3种人脑脊液混合样品和1种猴脑脊液混合样品配制了0.2、0.8、2和6ng/mL的过量加标的质控样品。准确度和精确度数值符合LC/MS/MS测定的控制标准。质控样品分析的典型结果如表3所示。
图3：比较使用负离子（失水产物离子）或正离子（b序列离子的产物离子）电喷雾模式的质谱特异度
图4：UPLC/MS/MS分析萃取自人工脑脊液+5%大鼠血浆的β淀粉样1-38、1-40和1-42肽
化合物名称：1-38
相关系数r=0.996956，r2=0.993921
校准曲线：0.333755*X+-0.0119724
响应类型：内标（参考品2）面积*（内标浓度／内标面积）
曲线类型：线性；来源：单一；加权：1/x；横轴：无
图5：萃取自人工脑脊液+5%大鼠血浆中的β淀粉样1-38肽的典型标准曲线
图6：显示3种人脑脊液和1种猴脑脊液中β淀粉样1-42肽基线水平的典型色谱图
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表2: 3种人脑脊液混合样品和1种猴脑脊液混合样品中β淀粉样肽的基线水平
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