粘粒和质粒文库的扩增实验
基本方案
实验材料 | 质粒 |
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试剂、试剂盒 | LB 甘油 |
仪器、耗材 | 硝酸纤维素膜 培养箱 |
实验步骤 |
1. 在含抗生素的平板上加一层硝酸纤维素膜,将抗药性细菌铺在硝酸纤维素膜上,培养细菌至菌落边缘正好相接。
4. 筛选文库时,取出一冻存小管,解冻并滴定细菌浓度,然后将细菌铺在筛选的滤膜上。
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注意事项 |
任何扩增步骤最值得关注的问题是每一个初始重组子要得到均等的扩增的机会,若重组菌的增殖率有所不同,将导致扩增文库的表现度过量或不足。
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