肥大细胞染色实验
实验方法原理
肥大细胞形态较大(20~30 μm),细胞核较小,细胞质内充满许多的圆形嗜碱性颗粒。由于颗粒中含有肝素等成分的多硫酸脂,也属于硫酸黏多糖类,能够被异染性染料着色,常用甲苯胺蓝染色法。
实验材料 石蜡组织切片
试剂、试剂盒 二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水冰醋酸甲苯胺蓝
仪器、耗材 滴管
实验步骤
甲苯胺蓝染色液:甲苯胺蓝 0.5 g,蒸馏水 100 ml。
冰醋酸分化液:冰醋酸 0.5 ml,蒸馏水 100 ml。
1. 石蜡组织切片 4 μm,脱蜡至水。
2. 甲苯胺蓝染色液染色 10 min,蒸馏水洗 2 次。
3. 冰醋酸分化液 30 s 左右,至颗粒清晰为止(显微镜控制)。
4. 蒸馏水洗 2 次,无水乙醇快速脱水。
5. 过滤纸吸干,二甲苯透明和中性树胶封固。
注意事项
1. 甲苯胺蓝液着色力较强,根据不同的组织,可适当缩短染色时间。
2. 冰醋酸分化液作用后,必要时用显微镜的高倍镜进行观察。
其他
结果:肥大细胞颗粒呈紫红色,细胞核呈蓝色。
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