黄曲霉毒素 M 族免疫亲和柱(AFM-IAC)使用说明
黄曲霉毒素 M 族免疫亲和柱(AFM-IAC)
1. 产品介绍
黄曲霉毒素 M1(AFM1)、M2(AFM2)是一种致癌性、致突变性强物质,属于黄曲霉毒素之一,对人类健康造成极大威胁,因此各国对乳及乳制品中黄曲霉毒素 M 族含量均有严格限量标准。
本产品将特异性黄曲霉毒素 M1(AFM1)、M2(AFM2)单克隆抗体交联在琼脂糖凝胶微球上,以抗原-抗体特异性结合为基础,对样品进行净化,将黄曲霉毒素 M1(AFM1)、M2(AFM2)特异性结合在免疫亲合柱上,其他物质流出,后经淋洗、洗脱、收集、检测等,完成对样品中黄曲霉毒素 M1(AFM1)、M2(AFM2)的测定。
本产品柱效、回收率、最大载量等均符合国家标准:
GB 5009.24-2016 (食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素M 族的测定)
GB 5413.37-2010(乳和乳制品中黄曲霉毒素 M1的测定)
2. 用途
适用于乳、乳粉,以及低脂乳、脱脂乳、低脂乳粉、脱脂乳粉等食品中黄曲霉毒素
M1(AFM1)、M2(AFM2)含量测定;样品中黄曲霉毒素 M1(AFM1)、M2(AFM2) 的净化,提取等。
3. 产品性能
性能 | 指标 |
基质 | 琼脂糖微球 |
配基 | 黄曲霉毒素 M1、M2单克隆抗体 |
载量 | ≥200ng /支 |
交叉反应率 | AFT M2≥80% |
回收率 | ≥85% |
规格 | 3ml*25 支/套 |
粒径 | 45~165μm |
上样推荐流速 | 1-2滴/秒 |
洗脱推荐流速 | 2-3秒/滴 |
工作温度 | 室温(22-25℃左右) |
储存缓冲液 | PBS 缓冲液 |
储存温度 | 4-8℃(严禁0℃以下保存) |
有效期 | 12个月 |
4. 操作流程
①样品处理:参照GB 5009.24-2016 (食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素M 族的测定) 中各法,对样品进行处理。②净化:以 GB 5009.24-2016 (食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素M 族的测定)为例说明(1) 柱子预处理:取出黄曲霉毒素 M 族免疫亲和柱, 恢复至室温(22-25℃),将上端塞子取出,打开下端堵头,将柱内保存液流掉至高于凝胶上界面3-5mm 处,停止流液(或将免疫层析柱直接连接于50ml 注射器下)。
(2) 加样:陆续加入总体积50ml 处理好的样品液过柱,打开下端堵头,调节流速支1-2 滴/秒,弃去流出液。(3) 淋洗:液体彻底排净后,加入10ml 蒸馏水,淋洗(如有需要,可增加淋洗次数)。
(4) 吹干:利用真空设备(如吸耳球、注射器等),压入空气,将柱子中的水吹干。
(5) 洗脱:加入4ml 乙腈(色谱纯),调节流速为2-3秒每滴,缓慢洗脱,洗脱时间不少于60s,收集全部洗脱液。(6) 处理:用和缓的氮气在30℃下将洗脱液蒸发至50-500ul(不要蒸干),再用水稀释
10倍至终体积为50-5000ul,即为净化后的样品。
③检测
净化后样品用质谱,高效液相、荧光等方法进行检测。
5. 注意事项
① 黄曲霉毒素属于致癌物,应避免于身体直接接触,操作时请注意穿戴好手套、口罩、实验服等。② 应当用5%次氯酸钠溶液对实验中接触使用过的玻璃容器进行浸泡过夜处理,避免污染。
③ 运输:4-25℃、常压、避光