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液相色谱仪主要部件介绍

2021.2.01

HPLC的出现不过三十多年的时间,但这种分离分析技术的发展十分迅猛,目前应用也十分广泛。其仪器结构和流程也多种多样。液相色谱仪一般都具备贮液器、高压泵、梯度洗脱装置(用双泵)、进样器、色谱柱、检测器、色谱工作站等主要部件。 

 

1 、高压泵
 HPLC使用的色谱柱是很细的(1~6mm),所用固定相的粒度也非常小(几μm到几十μm),所以流动相在柱中流动受到的阻力很大,在常压下,流动相流速十分缓慢,柱效低且费时。为了达到快速、分离,必须给流动相施加很大的压力,以加快其在柱中的流动速度。为此,须用高压泵进行高压输液。高压、高速是液相色谱的特点之一。
 

2 、梯度洗提
    梯度洗提,就是载液中含有两种(或更多)不同极性的溶剂,在分离过程中按一定的程序连续改变载液中溶剂的配比和极性,通过载液中极性的变化来改变被分离组分的分离因素,以提高分离效果。梯度洗提可以分为两种:
    a 低压梯度(也叫外梯度):在常压下,预先按一定程序将两种或多种不同极性的溶剂混合后,再用一台高压泵输入色谱柱。
    b 高压梯度(或称内梯度系统):利用两台高压输液泵,将两种不同极性的溶剂按设定的比例送入梯度混合室,混合后,进入色谱柱。

3 、进样装置
 (1)注射器进样装置:进样所用微量注射器及进样方式与GC法一样。进样压力<150×105Pa,当进样压力>150×105Pa时,必须采用停流进样。
(2)高压定量进样阀:与GC法用的流通法相似,能在高压下进样。

4、色谱柱
    色谱柱是色谱仪zui重要的部件(心脏)。通常用后壁玻璃管或内壁抛光的不锈钢管制作的,对于一些有腐蚀性的样品且要求耐高压时,可用铜管、铝管或聚四氟乙烯管。
柱子内径一般为1~6mm。常用的标准柱型是内径为4.6或3.9mm ,长度为15~30cm的直形不锈钢柱。填料颗粒度5~10μm ,柱效以理论塔板数计大约7000~10000 。
 





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