蛋白共沉淀检测实验_备择 用GST融合蛋白
| 实验材料 | |
|---|---|
| 试剂、试剂盒 | 谷胱甘肽-琼脂糖或者谷胱甘肽-琼脂糖浆抗体免疫共沉淀缓冲液氯化钠蛋白 A G-琼脂糖浆2 × 样品缓冲液（用于 SDS-PAGE 胶） |
| 仪器、耗材 | |
| 实验步骤 | 1. 按照蛋白 A/G-琼脂糖浆所述的方式准备两份样本（见「用蛋白A/G-琼脂糖」步骤 1），不加抗体。 2. 4℃ 下最大速度离心 10 min，沉淀非特异性聚集。转移上清到新的离心管中。 3. 加 30 μl 谷胱甘肽-琼脂糖或者谷胱甘肽-琼脂糖浆（25～30 μl 珠子体积）。确保在加到样本中之前琼脂糖浆均匀悬浮。 4. 旋转样本，沉淀然后洗谷胱甘肽-琼脂糖或者谷胱甘肽-琼脂糖浆，并且进行SDS- PAGE电泳和免疫印迹分析（见「用蛋白A/G-琼脂糖」步骤 5～10）。 |
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