超速离心法纯化病毒实验——差速离心法
| 实验方法原理 | 不同大小和比重的粒子在沉降速度上存在差别，沉降速度差别（相差）在一个或几个数量级的粒子，可用本法分离提取。 |
|---|---|
| 实验材料 | 待纯化的病毒 |
| 试剂、试剂盒 | 无 |
| 仪器、耗材 | 差速离心机 |
| 实验步骤 | 将被分离的样品交替进行低速离心与高速（或超速）离心。差速离心适用于从组织培养液、鸡胚尿囊液或经过红细胞吸附－释放的病毒悬液中提纯病毒。在由感染细胞或组织匀浆中提取病毒时，由于与病毒大小相近的细胞亚单位及碎片的存在，提纯效果不理想。 以差速离心法分离提纯病毒时，经常以低速 (2 000~3 000 r/min, 20~30 min) 及中速(10 000 r/min,20~30 min) 去除较大的宿主细胞碎片、污染的细菌及其它较大的杂质。然后，选择在 60 min 内能够沉淀 80% 以上的病毒粒子的较高速度，离心 1~2h使病毒沉淀。 |
| 注意事项 | |
| 其他 | 差速离心法的优点是能迅速处理大量样品，故常作为病毒精制的第一个阶段，或者用于病毒样品的浓缩和粗提。 |
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