超速离心法纯化病毒实验——界面离心分离法
| 实验方法原理 | 离心管内病毒悬液中的病毒和细胞碎片随其自身密度的大小而下沉或上浮到相等密度梯层中 |
|---|---|
| 实验材料 | |
| 试剂、试剂盒 | |
| 仪器、耗材 | |
| 实验步骤 | (1) 取浓缩后的病毒悬液 5 ml, 加入 1/5 或 1. 66/5 体积的 600 g/L 的蔗糖溶液，使其含蔗糖10%~15%, 摇匀。 (2) 取一内盛 4 ml 40%~60% 的蔗糖溶液的离心管，将上述病毒悬液小心铺加于此蔗糖溶液上面，于 20 000~40 000g( 根据病毒的大小和密度而定）离心 60~90 min血病毒在两个界面间形成一条明显的带。 (3) 小心用毛细吸管或注射针头吸出，此时病毒悬液中大部分密度大小不同的颗粒即被分开。密度较小的浮在上层，密度较大的沉在下层。以上过程必要时可重复一次。此法所制备的病毒悬液体积较小，纯度较高。 |
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