超速离心法纯化病毒实验——密度梯度离心
| 实验方法原理 | 病毒的密度与细胞碎片不同，用梯度制备仪制成适宜的介质梯度如蔗糖梯度或 CsCl 密度梯度，将病毒悬液加到密度梯度的上层，进行超速离心，离心管内病毒悬液中的病毒和细胞碎片随其自身密度的大小而下沉或上浮到相等密度梯层中，吸出含有病毒的沉淀带，即可得到相当纯净的病毒。 |
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| 实验材料 | |
| 试剂、试剂盒 | |
| 仪器、耗材 | |
| 实验步骤 | (1) 根据病毒的密度选择适宜的溶质，用梯度制备仪制成适宜的梯度介质，病毒的密度最好包括在梯度介质的中部或近介质底部 1/3 处。 (2) 将欲纯化的病毒悬液约 1 ml 小心铺加于梯度介质，以 20 000g~40 000 g 离心 2~4 h离心速度和离心时间的选择可根据病毒的大小而定，如流感病毒需 28 000 g,而如乙脑病毒则应40 000g 。 (3) 病毒沉于介质的中部形成一明显的沉淀带，另有若干杂蛋白带。小心吸出病毒并透析后，用生物学方法或电镜检查确定是否为病毒带。 |
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