登革热IgM ELISA试剂盒说明书(捕获法)（六）
回收率研究
五天内在不同的三个地点,两个不同的操作者完成对登革热 IgM Capture ELISA检测试剂盒可重现性研究实验的评估.样本(包括质控)均同时采用三份检测.实验分别在佛罗里达州一间公共健康实验室, InBios,美国中部的一家实验室.此次研究实验采用4份血清样本(均按照相关规定稀释).包括一份阴性样本,一份刚低于可疑范围的样本,一份可疑样本,一份阳性样本.血清样本的稀释均符合临床相关要求检测的浓度范围.具体结果见下表.
表13：inbiosa公司登革热试剂盒的再现性
板间试验 | 不同的时间 | 不同的操作者 | 不同的地点 | 合计 | ||||||||
样品 | N | ISR平均值 | Swr | %CVwr | SOD | %CVOD | SOO | %CVOO | Sss | %CVss | ST | %CVT |
板A | 90 | 1.133 | 0.148 | 13.06 | 0.056 | 4.96 | 0.066 | 5.86 | 0.064 | 5.63 | 0.158 | 13.97 |
板B | 90 | 1.587 | 0.245 | 15.41 | 0.187 | 11.79 | 0.182 | 11.44 | 0.081 | 5.11 | 0.308 | 19.40 |
板C | 90 | 2.433 | 0.621 | 25.52 | 0.668 | 27.46 | 0.522 | 21.44 | 0.207 | 8.52 | 0.912 | 37.49 |
板D | 90 | 5.821 | 1.18 | 20.28 | 2.014 | 34.59 | 1.072 | 18.41 | 0.693 | 11.91 | 2.334 | 40.10 |
阳性质控 | 90 | 11.944 | 1.692 | 14.17 | 2.437 | 20.40 | 2.085 | 17.46 | 1.546 | 12.94 | 2.967 | 24.84 |
阴性质控 | 90 | 1.148 | 0.152 | 13.25 | 0.088 | 7.67 | 0.064 | 5.61 | 0.051 | 4.47 | 0.176 | 15.31 |
所有值都用DENRA/NCA比值计算
Sx=标准划分，如wr是板间试验，DD不同天地试验，OO不同操作者的试验，SS不同地点的试验
CV=变异系数
交叉反应研究
用登革热 IgM Capture ELISA检测试剂盒检测带有几种疾病(见下表)的血清样本.样本均采用双份检测.检测得到阳性和可疑性的样本采用一式三份重测.用血小板减少中和反应检测阳性样本是为了评估登革热病毒的可暴露性.明显的交叉反应只在西尼罗河病毒中观察到。
表14：交叉反应
疾病或致病原 | 样品数 | DENV Detect IgM ELISA | 可疑和阳性样品合计 | 阳性或可疑率 | |
可疑 | 阳性 | ||||
东部马脑炎a | 10 | 0 | 0 | 0/10 | 0% |
乙脑a | 2 | 0 | 0 | 0/2 | 0% |
圣路易型脑炎a | 4 | 0 | 0 | 0/4 | 0% |
乙型肝炎a | 10 | 0 | 0 | 0/10 | 0% |
EB病毒a | 15 | 0 | 0 | 0/15 | 0% |
类风湿因子a | 7 | 0 | 0 | 0/7 | 0% |
丙型肝炎a | 10 | 0 | 0 | 0/10 | 0% |
巨型细胞病毒a | 10 | 0 | 0 | 0/10 | 0% |
核抗体a | 10 | 0 | 0 | 0/10 | 0% |
水痘带状疱状病毒a | 10 | 0 | 0 | 0/10 | 0% |
莱姆病a | 5 | 0 | 0 | 0/5 | 0% |
钩端螺旋体a,b | 11 | 0 | 0 | 0/11 | 0% |
西尼罗河a | 24 | 4 | 8 | 12/24 | 50% |
合计 | 112 | 4 | 8 | 12/128 | 9.4% |
a:筛查其他含有特异性IgM抗体的样品，与疟疾IgM抗体的交叉反应不能用inbios的登革热检测试剂盒评估
b:PRNT试验中，钩端螺旋体样品与登革热酶免试验发生反应，呈阳性（表格中不包括此结果，因为它不是真阳性样品）
除掉三份血清样品（一份西尼罗河阳性，一份乙脑阳性和一份钩端螺旋体阳性）的其他128份样品经PRNT验证后为阳性，24份筛查出的阳性或可疑样品经登革热ELISA重测后，有12份西尼罗河阳性样品，与西尼罗河的交叉反应率为50%。
