环丙沙星的检查方法
结晶性取本品少许,依法检查(通则0981),应符合规定溶液的澄清度与颜色取本品0.10g,加0.1mol/L盐酸溶液10ml溶解后,溶液应澄清无色;如显色,与黄色或黄绿色4号标准比色液(通则0901第一法)比较,不得更深有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品约25mg,精密称定,加7%磷酸溶液0.2ml溶解后,用流动相A定量稀释制成每1ml中约含0.5mg的溶液对照溶液精密量取供试品溶液适量,用流动相A定量稀释制成每1ml中约含1gg的溶液。杂质A对照品溶液取杂质A对照品约15mg,精密称定,置100ml量瓶中,加6mol/L氨溶液0.6ml与水适量溶解,用水稀释至刻度,摇匀,精密量取1ml,置100m1量瓶中,用流动相A稀释至刻度,摇匀。
系统适用性溶液取氧氟沙星对照品、环丙沙星对照品和杂质Ⅰ对照品各适量,加流动相A溶解并稀释制成每1ml中约含氧氟沙星5g、环丙沙星0.5mg和杂质I10g的混合溶液。灵敏度溶液精密量取对照溶液适量,用流动相A定量稀释制成每1ml中约含0.1pg的溶液。色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;流动相A为0.025mol/L磷酸溶液-乙腈(87:13)(用三乙胺调节pH值至3.0±0.1),流动相B为乙腈,按下表进行线性梯度洗脱;流速为每分钟1.5ml;检测波长为278m和262nm;进样体积20μl。时间(分钟)流动相A(%流动相B(%)1000000100系统适用性要求系统适用性溶液色谱图(278nm)中,环丙沙星的保留时间约为12分钟,氧氟沙星峰与环丙沙星峰和环丙沙星与杂质I峰之间的分离度均应符合要求。
杂质E、杂质B、杂质C、杂质I和杂质D峰的相对保留时间分别约为0.3、0.6、0.7、1.1和1.2。灵敏度溶液色谱图中(278nm),主成分峰峰高的信噪比应大于10测定法精密量取供试品溶液、对照溶液和杂质A对照品溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,杂质A(262nm)按外标法以峰面积计算,不得过0.3%;杂质B、C、D和E(278nm)按校正后的峰面积计算(分别乘以校正因子0.7、0.6、1.4和6.7),均不得大于对照溶液主峰面积(0.2%);其他单个杂质(278nm)峰面积不得大于对照溶液主峰面积(0.2%);各杂质(278nm)校正后峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的2.5倍(0.5%);小于灵敏度溶液主峰面积的峰忽略不计。干燥失重取本品,以五氧化二磷为干燥剂,在120℃减压干燥6小时,减失重量不得过1.0%(通则0831)。炽灼残渣取本品1.0g,置铂坩埚中,依法检查(通则0841),遗留残渣不得过0.1%。重金属取炽灼残渣项下遗留的残渣,依法检查(通则0821),含重金属不得过百万分之二十。
