放射免疫分析的标记方法
125I 标记化合物的制备方法可分为直接标记和间接标记两类方法。
(1)直接标记法
最常用于肽类、蛋白质和酶的碘化标记,其原理是采用化学或酶促氧化反应直接将125I结合于被标记物分子中酪氨酸残基或组胺残基上。其特点是标记方法操作简便,容易将较多的125I结合到被标记分子上,得到比放射性较高的标记物。但该法不适用于分子中不含前述可碘标记残基的化合物或可碘化残基位于被标记物的生物免疫活性功能域等情况。
(2)间接标记法
联接标记(Bolton-Hunter)是最常用的间接碘标记方法。该法主要用于甾体类化合物等缺乏供碘标记部位的小分子化合物。该法避免了标记反应中的氧化/还原剂对待标记物免疫活性的损伤,尤其适用于对氧化敏感的肽类化合物,以及某些不含酪氨酸残基的蛋白质(如半抗原)和酪氨酸残基未暴露在分子表面化合物的标记。不足之处是标记物的添加基团可能影响被标记物的免疫活性。
推荐
