制备小鼠T细胞杂交瘤
可通过将活化的T 细胞和肿瘤细胞融合获得T 细胞杂交瘤。异质性的杂交瘤可以通过有限稀释法克隆获得表达特异性T 细 胞 受 体 （T C R ) 的杂交瘤。杂交瘤可以在缺乏生长因子的条件下大量的扩增。研究证明，杂交瘤对研究T C R 特异性识别抗原以及C D 3-T C R 复合物的生物化学和分子生物学是非常有用的。
| 实验步骤 | 基 本 方 案 细 胞 融 合 和 T 细胞杂交瘤的选择材 料（带 V 项 目 见 附 录 1)小 鼠（用于体内可溶性蛋白或蛋白肽致敏 T 细胞的制备） 完全弗氏佐剂 反 应 细 胞（未致敏的淋巴结 T 细胞）和用于再次混合淋巴细胞反应中激活 T 细胞 用 的 刺 激 细 胞（表达所需同种异型抗原的脾细胞） B W 5147 淋 巴 瘤 细 胞 系（A T C C # TIB4 8 , 全 名 为 B W 5147.G .4.1，药物标记，在H A T 培养基中死亡，对 6-硫鸟嘌呤抵抗） 辅助方案 1 筛选表达 C D 3-T C R 原始杂交瘤在杂交瘤被转移到 2 4 孔 板 后 ，立 即 利 用 一 孔 进 行 初 筛（如 初 筛 C D 3-T C R 的表达）。被选择的细胞株应该通过有限稀释进行克隆和冻存（单 元 1 . 3 , 辅助方案）。 附 加 材 料
辅助方案 2 筛选抗原特异性的杂交瘤在辅助方案 1 中，只有一部分 C D 3-T C R + 的杂交瘤具有所需的抗原特异性，因此，需要测试候选杂交瘤的抗原特异性，而 不 是 保 存（克隆及冻存）所 有 的 C D 3-T C R + 的杂交瘤。 附 加 材 料
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