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概述细菌毒素检测的操作方法

2023.1.30

  1.外毒素检测

  (1)生物学方法:操作复杂,且不易获得敏感动物,动物的个体差异影响结果判断,只有在发现新毒素的特殊情况下采用。

  (2)免疫血清方法:具有快速、灵敏、特异的优点,且可进行大样品量筛选。有沉淀反应、颗粒吸附凝集试验(血凝试验和胶乳凝集试验)、固相放射免疫试验、酶联免疫吸附试验和免疫印迹试验。

  (3)核酸和基因诊断技术:基因探针技术可检查单个菌落产生毒素的性质,通常取病原菌染色体或质粒毒素基因片段制备成探针,利用放射性核素或非放射性生物系统标记,以检查未知标本,不需要培养细菌,操作简单。

  (4)自动化检测:仪器原理均根据微生物形态、代谢产物和血清学反应设计,包括细胞颗粒计数仪、光散射测定仪、颜色改变浓度仪、薄层扫描仪和荧光光度计等。

  2.内毒素检测

  (1)家兔热原试验:是将定量的被检测标本通过耳缘静脉注入家兔内,观察家兔注射后体温变化,判断是否存在内毒素。

  (2)鲎试验:是目前检测内毒素最敏感的方法,可检测量微量的脂多糖(LPS)(0.01~1 ug/ ml)。取少量鲎试剂放于两支试管中,加入蒸馏水使之溶解,其中一支试管加入少量标准内毒素,另一支加入蒸馏水进行对照,将上述两支试管轻轻摇匀后,垂直置于37℃温箱中,1h后观察有无凝固,发生凝固者为阳性,不凝固者为阴性。

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