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尿蛋白的检测方法

2021.12.09

  定性试验是用以筛选和粗略估计尿蛋白含量的方法。试验的方法有三种:试纸法、磺柳酸法和加热醋酸法。磺柳酸法和加热醋酸法都是根据浊度反应将无混浊或无沉淀定为阴性(一),将出现混浊或沉淀的定为阳性(+)。磺柳酸法操作简便,灵敏度高,可广泛用于普查,但其对白蛋白的灵敏度高于球蛋白,且影响因素较多,易造成假阴性或假阳性。加热醋酸法对白蛋白和球蛋白的灵敏度基本一致,影响因素少,准确性较高。

  磺基水杨酸法

  这是目前医院化验室常用的方法。试剂的配制:称取磺基水杨酸3克,加蒸馏水至100毫升面配成3%磺基水杨酸溶液。配好的溶液要贮存在棕色瓶内,放在不见阳光的暗处保存,以免失效。

  试验方法:取一个干净的玻璃试管,加入尿液2毫升左右,然后用滴管在尿上滴加试剂3~5滴,观察有无蛋白出现。

  结果判断:根据混浊、沉定和凝固的程度不同,确定“+”(加号)的多少。

  判断的标准:“-”:减号为阴性,说明无蛋白。加入试剂后,尿液仍清晰,在黑色背景时,仍看不到浊表现;

  “±”:加减号,代表尿里有微量蛋白。加入试剂后出现白色轻度混浊,仅在黑色背景时可以看到;

  “+”:一个加号,代表尿里有中等到量蛋白。加入试剂后,出现白色轻度混浊,无絮状颗粒出现;

  “++”:2个加号,代表尿里有量蛋白。加入试剂后,出现明显白色沉淀;

  “+++”:3个加号,代表尿里有多量蛋白。加入试剂后,出现絮状白色沉淀;

  “++++”:4个加号,代表尿里有大量蛋白。加入试剂后,立刻出现凝固成块,似胶胨样。

  根据浊度反应估算尿蛋白的含量如下:

  尿蛋白<0.1g/L:-;

  尿蛋白为0.1—0.2g/L:±;

  尿蛋白为0.2—1.0g/L:+;

  尿蛋白为1.0~2.0g/L:++;

  尿蛋白为2.0—4.0g/L:+++;

  尿蛋白>4.0g/L:++++。

  加热法

  过去实验室检查尿蛋白常用的方法,现已被磺基水杨酸法代替。此法简单,不需要什么试剂。

  方法:取一个玻璃试管,倒入被检查的尿液至三分之二处,加入2%酷酸或食醋数滴,用拇指和良指斜拿试管底部,放为焰上(如洒精灯)直接将试管上端的尿加热,经常转动试管,直到上段沸腾,观察有无混浊或出现沉淀凝固,根据程度按下述法判断加号。为了排除混浊不是由蛋白质引起的假阳性,应再加醋酸2~3滴或食醋10几滴,此时混浊不消失,则为阳性反应,说明是蛋白质。

  试纸法

  试纸是一各预先由试剂厂制好的专门供尿蛋白定性试验用的试纸,在医药商店可以购买。该试纸用试剂药浸泡过,遇蛋白质显蓝色,并附有一个标准色板,根据所测出蓝色深浅与这对比。方法比较简单,取一条试纸,浸入被检尿内,立即取出,约10~20分钟,观察有无蓝色显示。如无变化为阴性,显蓝色,即把所呈颜色;碱性尿液可出现假阳性,因此,在试验前先用石蕊试纸检查一下尿的酸碱度,如为碱性)在PH7.0以上),应先加几滴醋酸,使尿呈酸必再做。以上的三种方法是尿蛋白定性检查,只说明尿内有无蛋白和相对多少,不能说出确切的量。如果要了解每天排出多少蛋白质,可以做定量测定,需要留24小时的尿液,做蛋白定量测定。

  根据浊度反应估算尿蛋白的含量如下:

  尿蛋白<0.1g/L:一;

  尿蛋白为0.1—0.2g/L:±;

  尿蛋白为0.2—1.0g/L:+;

  尿蛋白为1.0~2.0g/L:++;

  尿蛋白为2.0—4.0g/L:+++;

  尿蛋白>4.0g/L:++++。

  正常尿液中含有微量蛋白质(24小时尿蛋白定量<150mg),普通检测方法不能发现,检查结果为阴性。超出此范围则可检出,称为蛋白尿。但由于尿蛋白试验只是测定一次尿的结果,易受尿液浓缩及稀释程度的影响,常常不能准确反映蛋白尿的程度。人体在剧烈运动、重体力劳动、情绪激动、过冷、过热及在应激状态时,尿蛋白的排出量均可增多,称一过性蛋白尿,在几小时或数天后即可恢复正常。

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