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台盼蓝(trypan blue)排斥实验

2019.4.04
实验方法原理

台盼蓝染料不能透过活细胞正常完整的细胞膜,故活细胞不着色,但死亡细胞的细胞膜通透性增加,可使染料通过细胞膜进入细胞内,使死细胞着色呈蓝色。是最常用的检测细胞活率的方法。

实验材料

细胞

试剂、试剂盒

台盼蓝生理盐水

仪器、耗材

显微镜玻片盖玻片滴管

实验步骤

1.  将待染色细胞稀释至所需浓度。(方法及浓度范围与细胞计数相同) 


2.  每0.1 ml 细胞悬夜约加新鲜配置的染液一小滴,室温下染3~5 min 。


3.  染色过的细胞材料,取一滴细胞悬液置玻片上,加盖玻片后放在高倍镜下观察。


4.  死亡的细胞着浅蓝色并膨大,无光泽;活细胞不着色并保持正常形态,有光泽。计数100~200个白细胞。


5.  统计未染色细胞。可按公式计算出细胞活力。 细胞活力(%)=未染色的细胞数/观察的细胞总数 × 100。

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注意事项

1.  染色时间不能太长,否则活细胞也会逐渐积累染料而染成颜色,使检测结果偏低。


2.  另可结合细胞计数方法,同时进行细胞计数和活力检测。


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