台盼蓝(Trypan Blue)染色法技术要点（一）
台盼蓝 (Trypan Blue)
染色法是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。正常的活细胞，胞膜结构完整，能够排斥台盼蓝，细胞不被染色；而死细胞的胞膜不完整，通透性增加，可使台盼蓝渗入将细胞染成蓝色。因此，借助台盼蓝染色可以简单、快速地区分活细胞和死细胞。
想当年小编还是初入实验室的小白时，以为台盼蓝染色的效果应该是这样的（左），然而现实却是那样的（右）
不是说好的“金标准”吗？染成这样哪里还能准？
如果你是Nexcelom的粉丝，从往期文章中应该了解过台盼蓝染色法的局限性，以及当前最受认可的AO/PI荧光染核法的原理和优越性（参考小知识）。
细胞的死亡状态
在细胞实验中，我们一般会遇到两种类型的细胞死亡：一种是自然状态下的死亡，即细胞自身的老化或营养耗尽造成的死亡，通常会经历比较长的过程；另一种是诱导的瞬间死亡，比如药物处理、热水浴等，通常会在短时间内发生作用。两种不同状态的细胞死亡会让台盼蓝染色出现不同效果吗？
自然死亡
为了模拟细胞在自然状态下的死亡，研究者将Jurkat细胞放置在常温下，并在0，6，12，24，48，72，96和168小时后取出部分细胞和0.4%台盼蓝1：1混合染色。
从图片中我们可以看到，从0-12小时，死细胞大多被染成较深的蓝色；而从24小时起，我们会观察到一些浅蓝色呈弥散状态的物体（红色箭头）。对于这样的未知物，研究者们起了一个可爱的名字 – “气球” [1]。这些“气球“到底是什么呢？是细胞变的还是某种杂质？
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