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电位滴定法测定真蛋白的方法介绍

2021.12.27

基本原理为:蛋白质的两端有游离的具有酸性的羧基(-COOH)和碱性的氨基(-NH2),当加入甲醛溶液时,氨基上的两个氢原子被次甲基所取代,于是便失去了氨基的碱性特性,从而使其呈酸性的羧基释放出来,使溶液的电化学特性发生变化。再用氢氧化钠标准溶液滴定游离的羧基(-COOH),从而用经验公式计算其蛋白质含量。

与凯式定氮法相比,该法可以排除三聚氰胺、尿素对牛乳中蛋白质测定的干扰,其次该方法所需检测仪器及试剂常规,操作简便,而且大大缩短了测定时间,提高了工作效率,具有一定的推广使用价值。

但从其原理中不难得出此法不能排除铵态氮(氯化铵、硫酸铵、碳酸铵等)的干扰,有一定的局限性。针对这一漏洞唐英伟等人在2009年提出了改进方法即:在测定前在试样中加入浓碱液加热检查有无氨气放出,验证有无铵态氮。若有,则先将铵态氮分离出去,再用电位滴定法测定;若没有,则可直接用电位滴定法测定。

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