染 性 疾 病 动 物 模 型——流 感 病 毒
| 实验步骤 |
基 本 方 案 1 流感病毒鼻腔内感染麻醉的小鼠这种方法可以建立所有呼吸道感染（鼻 、气管、肺）。 材料6〜8 周 龄 小 鼠（如 B A L B /c) I X l O 2〜I X l O 5 T CID5()/m l 流 感 病 毒（见辅助方案 2 和 4 滴定） 1 . 安全固定 6〜8 周 龄 小 鼠（附 录 2 0 , 氯胺酮/赛 拉 嗪 麻 醉（附 录 2D )。 如 果 实 验 需 要 定 量 测 定 肺 脏 病 毒 滴 度 ，应 避 免 使 用 吸 入 麻 醉 剂 ， 因 为 它 们 对 纤毛 的 抑 制 作 用 影 响 病 毒 的 清 除 。 2 . 捏住麻醉小鼠的背部使其头部向后倾斜，鼻 腔 向 上（目的是暴露鼻腔，使病毒更稳定地进入呼吸道）。应用移液管每侧鼻孔滴入 IOul I X I O 2〜IX I O 5T C I D 50/m l 流感病 3 . 将小鼠腹部置于温暖的地方使其恢复。 流 感 病 毒 可 在 同 一 笼 内 鼠 与 鼠 间 传 播 。 一 般 同 一 实 验 组 的 小 鼠 可 在 同 一 笼 内 饲养 。应 用 这 种 方 法 使 小 鼠 互 相 感 染 ， 同 时 增 强 了 病 毒 的 毒 力（见 基 本 方 案 2 ) 。 4 . 保存一份病毒样本以确定其滴度（见辅助方案 2)。 备 选 方 案 流 感 病 毒 鼻 腔 内 感 染 未 麻 醉 小 鼠用这种方法，最初的感染仅限于上呼吸道，病毒将于 3〜5d 内播散到气管及肺。 材 料 见 基 础 方 案 11 . 安全抓取和控制 6〜8 周 龄 小 鼠（附 录 2D ) ，防止其干扰操作。 2 . 捏住小鼠的背项部使其头部向后倾斜，鼻 腔 向 上（目的是暴露鼻腔，使病毒更稳定地进入鼻内）。应用移液管缓慢向两侧鼻孔滴入 I X IO2〜I X IO5T C I D 50/m l 流感病毒 在 进 行 鼻 腔 内 感 染 时 两 人 合 作 明 显 比 一 人 有 效 ，一 人 抓 取 并 固 定 小 鼠 ， 另一 人操 控 病 原 滴 注 。 辅 助 方 案 1 流感病毒在鸡胚中扩增材料9〜lld、无特异性致病原感染的鸡胚（SPA F A S 或 H y -Vac) 5000U /5 mg/ml (分别）青/链霉素溶液 I X IO3T C I D 50/ m l 流感病毒原液 |
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