格列美脲的鉴别检查方法
鉴别
(1)取本品适量,加乙醇溶解并稀释制成每1ml中约含10g的溶液,照紫外可见分光光度法(通则0401)测定,在228nm的波长处有最大吸收。(2)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集1085图)一致(3)取本品约0.1g与硝酸钾0.2g,混合,加热使炭化后灰化,放冷,残渣加水10ml使溶解,滤过,滤液显硫酸盐(通则0301)的鉴别反应。
检查
氯化物取本品1.0g,加水50ml,煮沸,迅速放冷,滤过,滤液加水使成50ml,取25ml,依法检查(通则0801),与标准氯化钠溶液7.0m制成的对照液比较,不得更浓(0.014%)。硫酸盐取本品0.50g,加水25ml,煮沸,迅速放冷,滤过,滤液加水使成25ml,依法检查(通则0802),与标准硫酸钾溶液2.0ml制成的对照液比较,不得更浓(0.040%)。氰化物取本品0.50g,依法检查(通则0806第一法),应符合规定。有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品适量,精密称定,加80%乙腈溶液溶解并稀释制成每1ml中含0.20mg的溶液。对照溶液精密量取供试品溶液1ml,置100ml量瓶中,用80%乙腈溶液稀释至刻度,摇匀。杂质对照品贮备液取杂质I、杂质Ⅱ、杂质Ⅲ、杂质Ⅳ对照品各适量,加80%乙腈溶液溶解并稀释制成每1ml中各约含100μg的溶液系统适用性溶液取格列美脲对照品约20mg,置100ml量瓶中,加杂质对照品贮备液2ml,加80%乙腈溶液溶解并稀释至刻度,摇匀。灵敏度溶液精密量取对照溶液1ml,置20m量瓶中,用80%乙腈溶液稀释至刻度,摇匀色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.1%磷酸二氢钠溶液(用磷酸调节pH值至3.0±0.5)-乙腈(50:50)为流动相;检测波长为228nm;进样体积20l。系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,出峰顺序依次为杂质Ⅲ、杂质Ⅱ、杂质Ⅰ、格列美脲与杂质Ⅳ,理论板数按格列美脲峰计算不低于2000,各色谱峰之间的分离度均应符合要求。灵敏度溶液色谱图中,格列美脲峰高的信噪比应不小于1测定法精密量取供试品溶液与对照溶液,分别注人液相色谱仪,记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍限度供试品溶液色谱图中如有与杂质Ⅰ、杂质Ⅱ保留时间一致的色谱峰,其峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.1倍(0.1%);如有与杂质Ⅲ保留时间一致的色谱峰,其峰面积乘以校正因子0.77后不得大于对照溶液主峰面积的0.4倍(0.4%);如有与杂质Ⅳ保留时间一致的色谱峰,其峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.2倍(0.2%);其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.1倍(0.1%);除杂质Ⅲ峰外,杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍(0.5%)。供试品溶液色谱图中小于灵敏度溶液色谱图中主成分峰面积的峰忽略不计(0.05%)。顺式异构体(杂质V)照高效液相色谱法(通则0512)测定供试品溶液取本品约12.5mg,精密称定,置25ml量瓶中,加二氯甲烷6ml,振摇使溶解,用流动相稀释至刻度,摇匀对照溶液精密量取供试品溶液1ml,置100ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀系统适用性溶液取杂质V对照品约5mg,置25ml量瓶中,加二氯甲烷5ml,振摇使溶解,用流动相稀释至刻度,摇匀取0.2ml,置1oml量瓶中,用供试品溶液稀释至刻度,摇匀。色谱条件用二羟基丙基键合硅胶为填充剂(Nagel100-5OH色谱柱,4.6mm×250mm或分离效能相当的色谱柱);以正庚烷-无水乙醇-冰醋酸(900:100:1)为流动相;检测波长为228nm;进样体积10l。系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,格列美脲峰的保留时间约为21分钟,杂质Ⅴ峰的相对保留时间约为0,9,杂质Ⅴ峰与格列美脲峰之间的分离度应符合要求测定法精密量取供试品溶液与对照溶液,分别注人液相色谱仪,记录色谱图。限度供试品溶液色谱图中如有与系统适用性溶液色谱图中杂质Ⅴ保留时间一致的色谱峰,其峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍(0.5%)。干燥失重取本品,在105℃千燥至恒重,减失重量不得 过0.5%(通则0831)炽灼残渣取本品1.0g,依法检查(通则0841),遗留残渣不得过0.1%。重金属取炽灼残渣项下遗留的残渣,依法检査(通则0821第二法),含重金属不得过百万分之十
