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动物基因组DNA快速提取试剂盒使用说明

2020.7.06

动物基因组DNA 快速提取(50 次)
概述:
本方法用于动物组织基因DNA 的快速提取,可提取107-108 动物细胞,其质量能够满足
各种分子生物学要求。
组成:
1.溶液A 1ml RNase A 10mg/ml。-20℃保存
2.溶液B 55ml
3.溶液C 100ml×2 两瓶,均为100ml
4.溶液D 3ml Resin 用时充分混匀
5. 溶液E 50ml 洗液(用前加入75ml 无水酒精,充分混匀)
6.溶液F 20ml TE buffer
步骤:
1.称取100-300mg 动物组织,液氮研磨成粉状,将粉末移入1.5ml 离心管中,加入1ml
溶液B,振荡混匀,室温放置5min。
2. 12000rpm 离心5min。
3.将上清移入5ml 离心管中,加入2.5ml 溶液C,20μl 溶液A ,50μl 溶液D,充分混匀,
室温放置20min。
4. ≥8000rpm 离心5min,弃上清。
5. 加入1ml 溶液C,充分混匀,≥8000rpm 离心1min,弃上清。
6.加入1ml 溶液E,充分混匀,≥8000rpm 离心1min,弃上清。
7.重复步骤6。
8. ≥12000rpm,离心1min,吸干上清,室温晾干约5-10min,使乙醇挥发殆尽。
9. 取溶液F 200-300μl,混匀,40-50℃水浴5min。
10.≥12000rpm 离心1min,取上清液即为DNA。
注:1.组织若多,可适当加大溶液B 和溶液D 的用量,其它成份不变。
2.混匀一定要温和,否则DNA 大分子将被打断使部分降解。
3.用户可依实验需要,适当调整溶液F 加入量,溶液F 越少,DNA 浓度越高,但产量略有损失,若
想最大限度提高产量,可重复步骤9、10。两次所得DNA 可合在一处。

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