叶酸片的检查及鉴别方法
鉴别
(1)取本品细粉适量(约相当于叶酸0.4mg),加0.4%氢氧化钠溶液20ml,振摇使叶酸溶解,滤过;取滤液10ml,照叶酸项下的鉴别(1)项试验,显相同的反应。(2)取上述剩余的滤液,加等量的0.4%氢氧化钠溶液稀释后,照叶酸项下的鉴别(2)项试验,显相同的结果
检查
有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。避光操作。供试品溶液取本品细粉适量(约相当于叶酸10mg),置具塞试管中,加入0.5%氨溶液10ml,置热水浴中加热20分钟,时时振摇使叶酸溶解,离心(每分钟4000转)15分钟,取上清液对照溶液精密量取供试品溶液1ml,置100ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀。系统适用性溶液、色谱条件、系统适用性要求与测定法见叶酸有关物质项下。限度供试品溶液的色谱图中,蝶酸峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.6倍(0.6%),单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积(1.0%),除蝶酸峰外各杂质峰面积之和不得大于对照溶液主峰面积的3倍(3,0%),小于对照溶液主峰面积0.05倍的峰忽略不计。含量均匀度5mg规格取本品1片,照含量测定项下的方法,自“置25ml量瓶中”起,依法测定,计算含量,应符合规定(通则0941)。0.4mg规格取本品1片,置10ml量瓶中,加0.5%氨溶液约5ml,置热水浴中加热20分钟,时时振摇使叶酸溶解放冷,用水稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液作为供试品溶液;另取叶酸对照品约10mg,精密称定,置50ml量瓶中,加0.5%氨溶液稀释至刻度,摇匀,精密量取2ml,置10ml量瓶用水稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。照叶酸含量测定项下色谱条件,精密量取供试品溶液与对照品溶液各10l,分别注人液相色谱仪,依法测定,计算含量,应符合规定(通则0941)溶出度5mg规格照溶出度与释放度测定法(通则0931第一法)测定。溶出条件以磷酸盐缓冲液(pH6.8)900ml为溶出介质,转速为每分钟100转,依法操作,经45分钟时取样供试品溶液取溶出液,滤过,取续滤液对照品溶液取叶酸对照品,精密称定,加溶出介质溶解并定量稀释制成每1ml中约含6μg的溶液。测定法取供试品溶液与对照品溶液,照紫外-可见分光光度法(通则0401),在281nm的波长处分别测定吸光度,计算每片的溶出量。限度标示量的70%,应符合规定。0.4mg规格照溶出度与释放度测定法(通则0931第三法)测定溶出条件以磷酸盐缓冲液(pH6.8)100ml为溶出介质,转速为每分钟50转,依法操作,经30分钟时取样。供试品溶液取溶出液10ml,滤过,取续滤液。对照品溶液取叶酸对照品,精密称定,加溶出介质溶解并定量稀释制成每1ml中约含4μg的溶液。测定法取供试品溶液与对照品溶液,照紫外-可见分光光度法(通则0401),在281nm的波长处分别测定吸光度,计算每片的溶出量限度标示量的75%,应符合规定其他应符合片剂项下有关的各项规定(通则0101)
