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细菌透射电镜样品制备实验—— 固定

2019.4.09
实验方法原理

为了保持菌体的原有形状,常用戊二醛、甲醛、锇酸蒸气等试剂小心固定后再进行染色。

实验材料

菌悬液

试剂、试剂盒

固定液(如 pH 7.20.15% 的戊二醛磷酸缓冲液)戊二醛无菌水2% 的磷钨酸钠水溶液

仪器、耗材

冰箱无菌毛细吸管无菌滤纸

实验步骤

1. 将用无菌水制备好的菌悬液经过滤,然后向滤液中加几滴固定液(如 pH 7.2,0.15% 的戊二醛磷酸缓冲液)。


2. 经这样预先稍加固定后,离心,收集菌体,制成菌悬液,


3. 再加几滴新鲜的戊二醛,在室温或 4 ℃ 冰箱内固定过夜。


4. 次日离心,收集菌体,再用无菌水制成菌悬液,并调整细胞浓度为 108~109个/毫升。


5. 按基本方案所述方法染色。

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