叶酸的检查方法
有关物质照高效液相色谱法(通则0512)
测避光操作供试品溶液取本品约100mg,置100ml量瓶中,加氨试腋约1ml使溶解,用流动相稀释至刻度,摇匀。对照溶液精密量取供试品溶液1ml,置100ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀系统适用性溶液取蝶酸10mg,置100ml量瓶中,加lmol/L碳酸钠溶液5ml与供试品溶液10m,加流动相溶并稀释至刻度,摇匀。色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以磷酸盐缓冲液(pH5.0)(取磷酸二氢钾2.0g,加水约650ml溶解,加0.5mol/L四丁基氢氧化铵的甲醇溶液15ml、lmol/L磷酸喀液Tml与甲醇270ml,放冷,用1mol/L磷酸溶液或氨试液调节pH值至5.0,用水稀释至1000m1)为流动相;检测波长为280nm;流速为每分钟1.2ml;进样体积10l系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,蝶酸峰与叶酸峰之间的分离度应大于4.0。测定法精密量取供试品溶液与对照溶液,分别注人液相色谱仪,记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍。限度供试品溶液的色谱图中,蝶酸与其他单个杂质峰面积均不得大于对照溶液主峰面积的0.6倍(0.6%)除蝶酸峰外各杂质峰面积之和不得大于对照溶液主峰面积的2倍(2.0%),小于对照溶液主峰面积0.05倍的峰忽略不计。水分取本品约0.1g,精密称定,加三氯甲烷-无水甲醇4:1)5ml,照水分测定法(通则0832第一法1)测定,含水分不得过8.5%。炽灼残渣不得过0.1%(通则0841)。
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