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重视标本采集在微生物检验中的意义

2021.5.15

医院感染病原体检验是临床诊治感染性疾病的一项常规手段,也是医院感染管理的一项重要内容。快速准确的病原诊断与监测,不但有助于指导临床用药,合理选用抗生素,降低耐药菌的产生和提高感染的治愈率,而且对预测或及时发现医院感染的暴发流行,杜绝感染蔓延,以及研究医院感染的发病机制和环节,制定有效的医院感染控制措施等,均具有十分重要的意义。

临床微生物检验包括实验室前和实验室部分两个环节,要想得到准确的检验结果,不仅要靠微生物室检验人员扎实的专业知识和必要设备,严格实施正确的微生物标本送检与检验方法更是做好医院感染病原菌检验监测的关键,但对于整个实验的分析前环节而言,标本的正确采集方法对于临床大夫和护理人员就显得尤为重要和必要。那么,如何正确的采集临床微生物标本呢?现就总结如下。

一.微生物标本采集的基本原则:

1. 发现疑似医院感染应及时采集微生物标本作病原学检查,二三级医院微生物标本送检率不应低于70%。

2. 尽量在抗生素使用前采集标本,对已用抗生素又不能停药者,可在下次用药前采集。

3. 采集过程全程无菌操作。

4. 标本采集后应立即送至实验室

5. 送检标本应明确注明来源和检验目的,使检验人员正确选用相应的培养基和培养环境。

6. 厌氧菌培养要求标本采集和运送环节全程隔绝氧气并立即送入实验室。

二.常见临床标本的采集送检方法

1. 血液与骨髓

(1) 通常采血部位为肘静脉。怀疑为细菌性心内膜炎时,以肘动脉或股动脉采血为宜,严格避免在静脉滴滴抗生素的静脉处采取标本。

(2) 采血部位皮肤严格消毒(通常顺序为75%酒精—碘伏—75%酒精)

(3)采血量:成人5-10毫升/瓶,儿童以及婴幼儿1-5毫升/瓶,培养基与血液之比为10:1为宜,这样可以保证培养基能充分稀释已用的抗生素、抗体等杀菌物质。

(4) 怀疑菌血症应及早采血,最好在体温上升前(寒战后或发热前)采血,但要防止因等待而延误时机。

(5) 每例病人才2-3次为宜,以防漏诊。

(6) 严禁把血培养瓶放置冰箱。(采血前后均不能)

2. 尿液

(1) 中段尿:女性采样前应先用肥皂水或0.1%高锰酸钾溶液冲洗外阴部及尿道口;男性须翻转包皮冲洗,用0.1%新洁尔灭消毒尿道口,灭菌纱布擦干后,收集标本。

(2)导尿采样可减少污染。对留置导尿者,可用碘酒消毒尿道口处的导尿管壁,用空针细针头斜穿管壁抽吸尿液或消毒后解开接口,弃去前端尿液,留无污染的膀胱内尿液数毫升送检。绝不可从集尿袋下端管口接取尿液标本。

(3)尿厌氧菌培养或培养结果与病情不符时,可经耻骨上膀胱穿刺采集无污染的尿液,送检标本以晨起第一次尿液为佳。

(4)尿液采集后立即送检,不能立即送检者,可暂存4C冰箱。

3. 痰液

(1) 咳痰:清水反复漱口后用力咳痰,从呼吸道深部咳出新鲜痰液于无菌容器送检。痰量极少者可用温的10%氯化钠吸入导痰。经口咳出的痰液须经痰涂片筛选,标准为:白细胞>25,鳞状上皮<10。

(2) 咳嗽乏力或昏迷病人,可用吸痰管经鼻腔或口腔抵达气管腔内吸引痰液。用纤维支气管镜可直接在病灶部位采集高浓度的感染病原菌,但不能完全避免咽喉部正常菌群污染。

(3) 双侧肺部感染伴人工气道如气管切开或气管插管患者,可用吸痰管经人工气道估插至支气管水平吸引痰液。

(4) 对重症、难治、伴免疫抑制,或疑为厌氧菌引起的院内感染,可采用环甲膜穿刺经气管吸引(TTA),经胸壁穿刺肺吸引(LA),经纤支镜或人工气道作防污染双套管毛刷(PSB)或防污染支气管肺泡灌注(PBAL),采集无口咽部正常菌群污染的痰液,经行准确的感染病原学诊断。

(5)如不能及时送检,放置4C冰箱。

4. 口咽拭子

(1)病人清水漱口后,由检查者将其舌外拉使悬雍垂尽可能向外牵引,棉拭子越过舌根到咽后壁或悬雍垂的后侧,反复擦拭数次,插入运送培养基。棉拭子应避免接触舌,口腔黏膜和唾液。

(2) 对化脓性扁桃体炎或口腔念珠菌病,用棉拭子在病灶部位擦数数次即可。

5. 伤口、烧伤创面与脓液

(1)无菌生理盐水擦洗病灶表面后,用棉拭子取病灶深部的脓液和分泌物,置运送培养基内送检。

(2) 对未溃破的脓肿宜用碘酒、酒精消毒皮肤后,以无菌注射器抽取脓液送检;也可于切开排脓时用无菌棉拭子采样。

6. 穿刺液

(1)穿刺液包括腹水,胸水,心包液,关节液,鞘膜液及脑脊液等,以严格无菌操作抽取数毫升液体置无菌试管或小瓶送检。

(2)严格无菌操作下采取脑脊液数毫升于无菌管。标本采集后立即送检,以防细菌死亡。疑有脑膜炎奈瑟菌时,应注意保暖,绝对不可置于冰箱。

7. 粪便

(1)排便后,挑取有脓液,粘血部分的粪便约2~3克(液状粪便择取絮状物),盛于广口瓶或无菌痰盒送检。

(2) 对不易获取粪便者或婴幼儿,可用直肠拭子采集。将拭子前端用无菌盐水湿润,然后插入肛门约4~5厘米(婴幼儿2~3厘米)处,轻轻旋转取直肠表面粘液后退出,置运送培养基内送检。

8. 生殖道标本

(1) 根据不同感染种类和病变特征采集不同的标本。采集尿道标本时,先用生理盐水局部清洗,以无菌棉拭子插入尿道口1~2厘米,停留十秒钟,轻轻旋转拭子后退出。

(2)对外阴部糜烂,溃疡者,生理盐水清洗后用棉拭子擦取病灶边缘的分泌物。

(3) 阴道和宫颈口分泌物需在窥阴器下用长棉拭子采集。

(4)子宫内分泌物需用无菌导管抽取。

(5)女性盆腔脓肿,应在阴道局部消毒后,由直肠子宫凹陷处进针抽取。

(6)前列腺液需进行前列腺按摩获取。

9. 组织标本

(1)表浅的感染组织和各种窦道标本可用棉拭子擦拭,小刀刮取,穿刺抽吸或手术切除。对窦道和瘘管应深部刮取管壁组织。

(2)深部标本可经皮穿刺采集和手术采集。标本置无菌容器并加少量生理盐水以保持湿度,或置肉汤增菌液。

(3)尸检标本应于死后20小时内采取。

(4)做病原体分离的组织标本,不可用福尔马林固定。疑有污染的较大的组织块,可将其置于沸水中5~10秒使其表面消毒后,再用无菌器械切开组织,取中央部位标本送检。

10. 静脉导管

(1)从病人体内拔出导管,用无菌技术剪去导管体内部分尖端处约5厘米,置于无菌容器中立即送检。

(2) 也可将剪下的导管体内段置肉汤增菌液或血培养液中送检。

俗话说,种瓜得瓜种豆得豆,我想这句话用在微生物检验中再适合不过了。台湾荣民医院著名微生物专家黄文贵教授曾经说过:你于我什么样的标本,我与你什么样的结果。可见正确的标本采集方法对于最后结果的影响是至关重要的。但是,目前的现状却不容乐观。临床微生物送检的标本中,仍有部分标本取材不良或者留取不当,这给微生物检验造成了很大的困难和误导,其中一些是医护人员给病患嘱咐不够,还有就是部分临床医护人员对微生物标本采集知识欠缺,因此,正确的采集方法,不仅能使微生物检验结果得到很好的保证,也会使标本的真阳性率进一步的提高,对于整个微生物病原检验都具有举足轻重的重要意义。


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