羟甲香豆素的鉴别检查方法
鉴别
(1)取本品适量,加乙醇2ml使溶解,在日光下显浅紫色荧光,加氢氧化钠试液2滴,溶液显蓝色荧光,加稀盐酸2~3滴,荧光即消失,置紫外光灯下照射显强黄绿色荧光。(2)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集438图)一致
检查
酸度取本品1.0g,加水50ml,振摇10分钟,滤过,取滤液,依法测定(通则0631),pH值应为5.5~7.0。有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。避光操作。供试品溶液取本品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中含1mg的溶液。对照品溶液(1)取羟甲香豆素对照品约20mg与间苯二酚对照品约10mg,精密称定,置同一100ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀。对照品溶液(2)精密量取对照品溶液(1)1ml,置200ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀。色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-磷酸盐缓冲液(0.156%磷酸二氢钠280ml加0.358%磷酸氢二钠720ml,用磷酸调节pH值至7.0)(49:51)为流动相;检测波长为270nm;进样体积20l。系统适用性要求对照品溶液(1)色谱图中,羟甲香豆素保留时间约为7分钟,间苯二酚峰相对于羟甲香豆素峰的保留时间约为0.5。间苯二酚峰与羟甲香豆素峰之间的分离度应大于10。测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液(2),分别注入液相色谱仪,记录色谱图至30分钟限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,按外标法以峰面积计算,间苯二酚不得过0.05%,其他单个杂质以对照品溶液(2)中羟甲香豆素峰面积计算,不得过0.1%,杂质总量不得过0.2%。硫酸盐取本品1.0g,加水40ml,振摇5分钟,滤过,取滤液20ml,依法检查(通则0802),与标准硫酸钾溶液2.0ml制成的对照液比较,不得更浓(0.040%)。干燥失重取本品,在105℃千燥至恒重,减失重量不得过0.5%(通则0831)。炽灼残渣取本品1.0g,依法检查(通则0841),遗留残渣不得过0.1%。重金属取炽灼残渣项下遗留的残渣,依法检查(通则0821第二法),含重金属不得过百万分之十
