盐酸四环素的检查方法
酸度取本品,加水制成每1ml中约含10mg的溶液,依法测定(通则0631),pH值应为1.8~2.8溶液的澄清度取本品5份,各50mg,分别加水5ml使溶解,溶液应澄清;如显浑浊,与1号浊度标准液(通则0902第一法)比较,均不得更浓。(供注射用)有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。临用新制。供试品溶液取本品,加0.0lmol/L盐酸溶液溶解并稀释制成每1ml中约含0.8mg的溶液。对照溶液精密量取供试品溶液2ml,置100ml量瓶中,用0.01mol/L盐酸溶液稀释至刻度,摇匀。系统适用性溶液取4-差向四环素对照品、土霉素对照品、差向脱水四环素对照品、盐酸金霉素对照品及脱水四环素对照品各约3mg与盐酸四环素对照品约48mg,置100ml量瓶中,加0.1mol/L盐酸溶液10ml使溶解后,用水稀释至刻度,摇匀。灵敏度溶液精密量取对照溶液2ml,置100ml量瓶中,用0.01mol/L盐酸溶液稀释至刻度,摇匀色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以醋酸铵溶液[0.15mol/L醋酸铵溶液-0.0lmol/L乙二胺四醋酸二钠溶液-三乙胺(100:10:1),用醋酸调节pH值至8.5]-乙腈(83:17)为流动相;检测波长为280nm;进样体积为10pl。系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,出峰顺序为:4-差向四环素、土霉素、差向脱水四环素、四环素、金霉素脱水四环素,四环素峰的保留时间约为14分钟;4-差向四环素峰、土霉素峰、差向脱水四环素峰、四环素峰、金霉素峰各峰间的分离度均应符合要求,金霉素峰与脱水四环素峰之间的分离度应大于1.0。灵敏度溶液色谱图中,主成分峰峰高的信噪比应大于1测定法精密量取供试品溶液与对照溶液,分别注人液相色谱仪,记录色谱图至主成分峰保留时间的2.5倍限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,土霉素、4-差向四环素、盐酸金霉素、脱水四环素、差向脱水四环素按校正后的峰面积(分别乘以校正因子1.0、1.42、1.39、0.48与0.62)分别不得大于对照溶液主峰面积的0.25倍(0.5%)、1.5倍3.0%)、0.5倍(1.0%)、0.25倍(0.5%)、0.25倍(0.5%),其他各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍1.0%),小于灵敏度溶液主峰面积的峰忽略不计杂质吸光度取本品,在20~25℃时,加0.8%氢氧化钠溶液制成每1ml中含10mg的溶液,照紫外可见分光光度法(通则0401),置4cm的吸收池中,自加0.8%氢氧化钠溶液起5分钟时,在530m的波长处测定,吸光度不得过0.12。(供注射用)干燥失重取本品,在105℃干燥至恒重,减失重量不得过1.0%(供口服用)或0.5%(供注射用)(通则0831)。热原取本品,加氯化钠注射液制成每1ml中含5mg的溶液,依法检查(通则1142),剂量按家兔体重每1kg缓慢注射2ml,应符合规定。(供注射用)无菌取本品,用适宜溶剂溶解并稀释后,经薄膜过滤法处理,依法检查(通则1101),应符合规定。(供无菌分装用)
