植物提取物中多种有机氯农残检测前处理
方案优势
采用微波萃取、GPC净化能较好地除去植物提取物中的色素及油脂等大分子杂质，回收率也较高。
采用标准
国家相关标准
方法/原理/步骤
1样品的提取
1.1称取5克植物提取物样品6份，用1：1的石油醚-丙酮浸泡过夜后振摇提取三次，每次半小时，合并提取液，用无水硫酸钠脱水后旋转浓缩近干，用正己烷溶解残渣待净化。
1.2称取同样的样品6份，用同样的提取液，用微波萃取三次，总共约一小时，同上脱水浓缩待净化。
2、样品的净化
2.1硫酸磺化法
取1.1和1.2提取后的样品各两份，用硫酸磺化。处理完后定容至5毫升待上机检测。
2.2取1.1和1.2提取后的样品各两份，用弗罗里硅层析柱净化，浓缩后定容至5毫升待上机 检测。
2.3取1.1和1.2提取后的样品各两份，用GPC净化浓缩后定容至5毫升待上机检测。
2.4取标样分别用硫酸磺化、弗罗里硅层析柱净化、GPC凝胶净化三种方法处理，考查标样不加本底时的回收率情况。
仪器设备
仪器设备及试剂
Angillent 6890N气相色谱仪(带ECD检测器)，DB-1701毛细柱，微波萃取仪(CEM，美国)，凝胶渗透色谱仪(GPC Vario,德国LC-tech)，旋转浓缩仪，弗罗里硅层析柱等。所用试剂均为分析纯或色谱纯。
结果与讨论
结果
气相色谱图比较
检测结果(ppb)比较：见下表1：
|
项 目 |
GPC净化 |
弗罗里硅柱净化 |
硫酸磺化法净化 |
|
五氯苯胺 |
760 |
657 |
354 |
|
腐霉利 |
未检出 |
未检出 |
未检出 |
|
五氯苯 |
270 |
189 |
147 |
|
四氯硝基苯 |
160 |
145 |
113 |
|
四氯苯胺 |
35 |
17 |
未检出 |
|
a-BHC |
110 |
69 |
64 |
|
b-BHC |
35 |
29 |
28 |
|
r-BHC |
14 |
12 |
12 |
|
d-BHC |
未检出 |
未检出 |
未检出 |
|
O,p’-DDT |
未检出 |
未检出 |
未检出 |
|
p,p’-DDT |
未检出 |
未检出 |
未检出 |
|
P,p’-DDE |
未检出 |
未检出 |
未检出 |
|
六氯苯 |
510 |
506 |
128 |
|
五氯硝基苯 |
2110 |
2008 |
1887 |
|
甲基五氯苯基硫醚 |
5010 |
4879 |
4092 |
|
狄氏剂 |
未检出 |
未检出 |
未检出 |
|
灭菌丹 |
21 |
未检出 |
未检出 |
|
敌稗 |
未检出 |
未检出 |
未检出 |
回收率结果比较：见下表2：
|
项 目 |
硫酸磺化法回收率（%） |
弗罗里硅柱净化法回收率（%） |
GPC净化法回收率（%） |
|
五氯苯胺 |
46.8 |
87.4 |
89.8 |
|
腐霉利 |
45.2 |
89.1 |
92.1 |
|
五氯苯 |
56.7 |
92.3 |
95.5 |
|
四氯硝基苯 |
78.9 |
91.0 |
91.2 |
|
四氯苯胺 |
45.5 |
81.8 |
89.8 |
|
a-BHC |
93.5 |
94.5 |
94.9 |
|
b-BHC |
82.3 |
80.7 |
88.8 |
|
r-BHC |
85.9 |
87.6 |
92.6 |
|
d-BHC |
86.8 |
88.0 |
95.1 |
|
O,p’-DDT |
92.9 |
84.0 |
94.0 |
|
p,p’-DDT |
86.7 |
88.6 |
91.6 |
|
P,p’-DDE |
76.5 |
82.1 |
92.3 |
|
六氯苯 |
24.8 |
95.3 |
94.6 |
|
五氯硝基苯 |
84.3 |
93.2 |
93.9 |
|
甲基五氯苯基硫醚 |
65.5 |
83.8 |
91.0 |
|
狄氏剂 |
11.2 |
90.5 |
92.5 |
|
灭菌丹 |
5.42 |
92.1 |
93.1 |
|
敌稗 |
4.35 |
93.2 |
94.5 |
讨论
1、传统的浸泡提取法与微波提取法得率并没有差别，但微波提取法用时少，用的提取剂量也少，节约了时间和试剂，也就是节约了成本。
2、硫酸磺化可以除油脂，狄氏剂、DDT、灭菌丹和敌稗的标样回收率极低，但本底加标回收时却很高，原因是本底中的大量杂质没有得到去除，干扰了检测结果，造成假阳性。
3、用弗罗里硅层析柱净化可以除去叶绿素，但无法除去叶黄素和大量的油脂，而GPC净化可以最好地去除各种杂质，得到的谱图干净、分离度好。
由于GPC可以净化、浓缩定容一体完成，自动化程度高，可连续无人操作，节省了人力，成为大批样农残分析的首选方法。
本研究采用了德国LC-tech公司生产的全自动凝胶渗透净化仪用于样品的初级提纯。该仪器填充柱内装了50克200-400目的多孔交联的聚苯乙烯聚合物(Bio-BeadsSX3)。本实验中，GPC的流动相为二氯甲烷，压缩系数设定为0.70。GPC淋洗净化的初始设置参数为：
流动相流速：洹流方式，5mL/min
Forerun：840秒；Mainrun：900秒
Tailing：300秒
