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用带正电荷的尼龙膜时,如果用碱性转移缓冲液,则转移的DNA可共价结合于膜上。
DNA
NaOHNaCl
电泳仪
1. 印迹法中步骤1和歩骤2中所述准备凝胶及用0.25 mol/l HCl处理。2. 用蒸馏水漂洗凝胶,并用10倍体积的0.4 mol/l NaOH变性,缓慢摇动20 min。
3. 用0.4 mol/l NaOH替代20xSSC作为转移液进行转印。转印时间≥2 h。
4. 取出膜,用2xSSC漂洗,置于一张Whatman 3 MM 滤纸上晾干,保存于室温。
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