OB免疫及化学检测方法中的常见问题及答疑
1、为什么说“半定量双联法”是检测便隐血的最佳方法？如何进行结果判断？
答：可分别参见表1和2
表1
| 免疫法 | 化学法 | |
| 特异性 | 高 | 低 |
| 灵敏度（ug/g stool） | 高（0.1） | 较高（50） |
| 对上消化道出血的漏检（检出率） | 会（约60%） | 不会（100%） |
| 钩状效应（Hook’s效应） | 有 | 无 |
| 半定量 | 不能 | 能 |
| 检测成本 | 高 | 低 |
| 大批量人群普查 | 不适合 | 适合 |
| 保存、效期 | 不易、短 | 易、长 |
表2 . 结果判断
免疫法 | 化学法 | 分析 |
| 阳性（+） | 阳性（+） | 确定为阳性结果，化学法可查出其出血程度（半定量） |
| 阳性（+） | 阴性（-） | 确定为阳性结果，但其检体隐血的含量极微少 |
| 阴性（-） | 阴性（-） | 确定为阴性结果 |
| 阴性（-） | 阳性（+） | 1、此病人为上消化道微量出血（此种情形可能性较低）2、化学法的阳性结果为食物或药物所引致的假阳性（此种情形的可能性较高）。3、Hook’s效应导致的免疫法为假阴性。 |
2、检测便隐血的方法是否越灵敏越好？最佳检测便隐血的灵敏度是多少？
答：不是。用5lCr标记检查正常人粪便中每天血液丢失量为0.5±0.4ml（最多可达1.5ml），相当于每克粪便的含量为100-900ìgHb，平均为500ìgHb，故试剂的检测灵敏度在50ìgHb/g stool时能查出所有病理及部分生理状况下的人群，而再提高灵敏度可能只会增加检测的非病理状况下的阳性。
3、两类方法实测灵敏度的差异。
答：免疫法的检查终产物是经过标本稀释（已做了500倍左右的稀释处理）后的产物。其实测若以灵敏度为0.1ìgHb/g stool计算，其最终测得最低值也为50ìgHb/g stool。故其粪OB检查的阈值应定为50ìgHb/g stool较合适。
4、何为钩状效应（Hook’s效应）？其对实验结果的影响及解决方法。
答：Hook’s效应为单克隆抗体与所抗的Hb抗原不匹配或消化道出血过多，抗原过剩时造成的假阴性结果。其解决方法为将标本继续做1:500倍的稀释后再做实验。
5、为什么免疫法会漏检上消化道出血？
答：上、下消化道出血以胃底部为分界。
上消化道出血：
每天出血量与检测阀值
| 胃 | 结肠 | |
| 卟啉实验 | 2ml | 2ml |
| 愈创木脂 | 10-20ml | 0.5ml |
| 免疫法 | 100ml | 0.25ml |
6、在三种化学方法中，为什么选择“匹拉米洞法”作为首选方法？
答：目前常用的三种化学方法及各自特点见下表：
| 联苯胺 | 愈创木脂（水溶、非水溶） | 匹拉米洞 | |
| 致癌性 | 有 | ? | 无 |
| 灵敏度 | 高 | 低 | 中 |
| 假阳性率 | 高 | 中 | 低 |
| 成本 | 低 | 高 | 中 |
| 商品化产品 | 无 | 有 | 有 |
| 生产质控 | 难 | 难 | 方便 |
7、匹拉米洞半定量值分几级？
答：分5级。
8、如何避免新鲜蔬菜对化学法的干扰（假阳性）？
答：多煮并煮熟蔬菜，可全面去除其干扰。
9、如何进行便隐血标本的稀释处理（等渗盐水、蒸馏水、低渗缓冲液）？
答：化学法用蒸馏水，免疫法用低渗缓冲液；二者禁用等渗盐水。
10、为什么要多点采集样本？
答：避免采样误差。
11、为什么说“双联法”是最适合大批量肠癌筛查的首选方法？
答：实验成本低，准确性高、灵敏度高，操作、质量管理方便等。
12、免疫法有无假阴、阳性？
答：免疫法也有假阳性，如饮用啤酒等；若检体的pH值改变：pH≤3时呈假阳性、pH≥10时呈假阴性；大分子蛋白可能包裹Hb并使之不易暴露，直接影响Hb与Hb抗体的结合而导致胶体金法假阴性等。大家可以多做实验进行探讨。
