分享至
核酸检测多次只有一次阳性，是新冠病毒狡猾还是方法没找对？
点击上方蓝字
关注我们，更多精彩资讯抢先看！
近日总看到一系列新冠病毒核酸检测“假阴性”的报道，引起不少大众的恐慌。如前几天有一例北京的病例，第7次核酸检测，才确定为阳性。
2021年1月4日大连通报的一例新冠患者在第11次核酸检测后才得到确诊。
究竟是什么原因导致了新冠病毒核酸检测结果的假阴性呢？有没有什么方法去解决这类问题？
1.关于第一个问题——导致假阴性的检测结果的原因，我们看看专家给出的回答。
首都医科大学附属北京同仁医院检验科刘向祎主任是这样说的：“从时间上判断，11次检测涵盖了病毒感染的检测周期，理论上是可以测出来的。但10次阴性，可能与试剂盒检测性能有关，还与个体新冠病毒载量、采样部位、采样量、采样水平以及实验室检测条件和人员操作有关，原因非常复杂。不排除个别特殊病例，病毒载量非常微量，可能检测不出来，结果一直是阴性。携带病毒却检测不出，我们称之为检测“假阴性”。整个检测包括采样、运输、灭活、核酸提取、PCR反应等很多步骤，每个环节的错误操作都可能导致“假阴性”。” 来源：科技日报
关于第二个问题——到底有没有什么方法去解决这类问题呢？
答案是有的。国务院于2020年12月30号发布了医疗机构新冠病毒核酸检测工作手册（试行第二版），进一步规范新型冠状病毒（以下简称新冠病毒）核酸检55测的技术人员、标本单采、标本混采、标本管理、实验室检测、结果报告等工作，保证检测质量，提高检测效率。
但是所有问题最终可以归结为病毒载量低，目前现有的检测手段受限。对于低于检测限的这类样本，我们该如何去优化呢？
Tecan Genomics的研发团队基于单引物恒温扩增技术（SPIA）开发了一套专门针对qPCR检测样本的前处理试剂盒Crescendo cDNA synthesis。相比目前市面上常用的一链cDNA合成法，Crescendo cDNA synthesis for qPCR可以为每个RNA转录本生成更多的拷贝，使qPCR对于低丰度转录本的检测更为理想。
图1 从鼻腔拭子样品检测SARS-CoV-2。
A)从COVID-19阳性鼻腔拭子分离总RNA。所得的RNA产量低（2.8 ng /_L），且严重降解，RIN值为2.3，明显降解。
B)取约7 ng总RNA作为起始材料，分别利用Crescendo cDNA Synthesis for qPCR试剂盒或N公司的一链合成试剂盒处理。
通过这两种cDNA合成方法获得的最终cDNA，取同体积复溶在同体积溶液中进行qPCR分析。Crescendo合成的cDNA均被N1 (Ct = 23.1)和N2 (Ct = 32.6) 两个TaqMan探针集检出SARS-CoV-2病毒。而一链合成试剂盒合成的cDNA，即便在45个PCR循环后，仍然没有任何N1（单个重复信号）或N2信号被检出，无法提供明确或阳性结果。Crescendo cDNA Synthesis for qPCR试剂盒提供的cDNA转换和扩增方法，在处理低起始量和降解样品时，具有明显的检测灵敏度优势。
更多产品信息请参考往期内容：
Revelo RNA-Seq文库制备试剂盒助攻人源病毒性病原体的mNGS测序
关于帝肯
帝肯（www.tecan.com）是全球领先的生物制药、法医学和临床诊断实验室仪器和解决方案供应商之一。公司专门从事生命科学领域实验室自动化工作流程解决方案的开发、生产和分销。其客户包括制药和生物技术公司、大学研究部门、法医和诊断实验室。作为一家原始设备制造商（OEM），帝肯也是开发和制造OEM仪器和部件的佼佼者，然后由合作公司分销。公司于1980年在瑞士成立，在欧洲和北美均设有生产、研发基地，并在52个国家设有销售和服务网络。2018年，帝肯销售额为5.94亿瑞士法郎（6.06亿美元；5.16亿欧元）。帝肯集团的注册股份在瑞士六大交易所（TECN；ISIN CH0012100191）交易。
帝肯热线：4008 213 888
帝肯官网：www.tecan.com
