电动移液器让连续稀释更准确

赛多利斯实验室

2022.5.11

Abstract

连续稀释是药物发现中剂量反应曲线的重要组成部分。连续稀释在检测限测试、qPCR分析的标准曲线以及各种分析和仪器的校准曲线中也发挥着重要作用。连续稀释的准确度是对结果有显着影响的一个重要因素。使用电动移液器进行连续稀释可提高样品浓度的准确度，并减少连续稀释中最高稀释度下的误差传播。

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《使用电动移液器改善连续稀释的准确度》应用说明通过研究证明了电动移液器是在制备连续稀释液中的更优选择。此外，电动移液器具备改进的人体工程学设计，能对样品进行电动混合，并具有对移液方案进行预编程的能力，这些功能为其在连续稀释液制备中的应用带来了更多的优势。

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引言

连续稀释在药物发现中扮演着重要的角色。在生物制药行业，质量控制实验室越来越多地将用到连续稀释的质量控制工艺合并，其中包括使用吸光度法或荧光染料来间接推断稀释性能、准确度和精确度。

制备连续稀释液的主要挑战是准确度和时间。移液过程中误差的传递会影响连续稀释的准确性。

本应用说明的目的是测试使用电动移液器进行准确连续稀释的可靠性。我们使用电动移液器和领先的手动移液器制备连续稀释液，并进行对比。

在本应用说明中，我们对连续稀释液进行了以下测试：

移液器类型
稀释液浓度的准确度
稀释液浓度的精确度（重现性）

方法

移液器和移液器吸头

使用赛多利斯Picus® 电动移液器、赛多利斯Safetyspace低吸附吸头和优质的手动移液器制备连续稀释液。

连续稀释

对稀释DNA进行直接吸光度检测，用于对连续稀释的准确度进行定量。采用无核酸酶水制备沙门氏菌DNA。使用手动或电动移液器制备了沙门氏菌DNA的七点二倍连续稀释液。

数据分析

分析数据的线性度、准确度和重现性。通过将浓度测量值与相应稀释因子的倒数作图并确定R2值，来确定稀释系列的线性度。稀释系列的准确度（浓度测量值与预期浓度的接近程度）由百分比误差（不准确度%）表示。将浓度测量值减去预期浓度，再除以浓度测量值，然后转换为百分比，即可得到准确度（不准确度%）。稀释系列的精确度（重现性）用变异系数（CV%）表示，计算方法为用三次重复测试的标准偏差除以平均浓度，然后转换为百分比。

结果

使用电动移液器或手动移液器制备的连续稀释液生成的线性图表明，两种手持式移液器制备的稀释系列都具有线性，两者的R2值均为0.9999（图1）。

图1：连续稀释液的线性。（A）Picus® 电动移液器（B）优质手动移液器

准确度

为了评估稀释系列的准确度，将每个稀释步骤的测量浓度与预期浓度进行对比。用电动移液器操作的预期浓度和实际浓度之间的差异始终小于 5 %。对于稀释系列中的最高稀释度，与使用手动移液器获得的结果相比，使用电动移液器提高了最高稀释度样品的准确度（图2）。

图2.优质手动移液器与电动移液器的连续稀释准确度对比

重现性

重现性（或移液精确性）对连续稀释来说非常重要。对于使用Picus® 电动移液器制备的三次连续稀释液，其连续稀释浓度的百分比变异系数（CV%）很低，远低于 5 %（表1）。

讨论

数据表明，电动移液器是制备连续稀释液的理想选择。尽管电动和手动移液器均能提供可靠的连续稀释，且结果均具有良好的准确度和重现性，但与手动移液器相比，电动移液器获得的结果更准确，并且在连续稀释的最高稀释度的浓度误差更小（误差传播更小）。

对于长时间连续移液操作（例如连续稀释液的制备）来说，相比手动移液器，电动移液器可实现更准确且可重复的活塞移动，因此更具优势。此外，电动移液器消除了手动控制的影响，移液量不依赖于操作人员的的移液经验，因此可提供可重现的结果。

Picus® 电动移液器

Picus® 电动移液器是市场上最符合人体工学设计的移液器之一。使用符合人体工程学的电动移液器进行移液操作意味着能够以更符合人体工程学的方式更快地完成移液系列操作，并且减少因用户疲劳引起的错误。电动移液器还有许多额外优势，可以实现更好的连续稀释。例如，Picus® 具有专为稀释系列定制的多种移液模式，包括正向移液附加混合功能和序列分液模式。与手动移液器不同，电动混合步骤可确保用户不会因长时间连续的混合操作而感到疲劳，因此不会对结果产生影响。Picus® Nxt移液器具有可编程的额外优势。可提前将用户的连续稀释移液方案保存在移液器上，进一步确保移液准确度并缩短移液时间。

Summary

进行连续稀释可能具有挑战性，但使用电动移液器可以显著改善这一过程。使用电动移液器制备连续稀释液是可靠的，它能够确保尽可能攻克准确度（将误差传播最小化）和时间这两个主要挑战。

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