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乳中掺尿素检测（二）
关键词：有证标准物质 国家环境标准物质 欧洲标准品 中检所对照品乳中掺尿素检测（二）
②检测：取乳样(5 mL)于试管中，加1％NaNO2液及浓H2SO4各1 mL，混匀，5 min后，加Griess试剂0．5 g，混匀，观察，呈黄色为掺有尿素；紫色为正常乳(同时做正常乳实验)。
3．丁二酮肟分光光度法
①试剂
a．乙醇。
b．丁二酮肟液：取丁二酮肟0．3 g，加HCl 10 mL，临用时配制。
c．0．2％氨基硫脲液。
d．尿素标准贮存液，0．1 mg·mL-1。
e．尿素标准应用液，10µg·mL-1。
②仪器：分光光度计。
③标准曲线制备：分别吸取尿素标准应用液(10µg·mL-1)0．0mL、0．1 mL、0．2 mL、0．4 mL、0．6 mL、0．8 mL、1.0 mL于试管中，加水4 mL、0．2％氨基硫脲液0．2 mL，摇匀，加丁二酮肟液0．8 mL，摇匀，显色液于沸水浴加热12 min，冷却，水定容至l0 mL。用1 cm比色皿，在分光光度计，波长520 nm测吸光度，绘制标准曲线。
④检测：取乳样10 mL于锥形瓶中，加乙醇50 mL，振荡30 min，静置，定容至100 mL，上清液过滤，取滤液1 mL于试管中，加水4 mL、0．2％氨基硫脲液0．2 mL，摇匀，加丁二酮肟液 0．8 mL，摇匀，显色液于沸水浴加热12min，冷却，水定容至10 mL。用1cm比色皿，在分光光度计，波长520 nm测吸光度，同时做空白实验。
从标准曲线即可得尿素的含量。
⑤计算
X=(CS*V2)/(V1*V)
式中：X——乳中尿素含量，µg·mL-1；
CS——从标准曲线上查得样液中尿素含量，µg；
V1——样液检测体积，mL；
V2——样品提取液总体积，mL；
V——样品体积，mL。
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