YIJI蛋白样品树脂法去内毒素试剂盒使用说明
主要用途
YIJI蛋白样品树脂法去内毒素试剂是一种旨在通过脂多糖亲和树脂过滤和吸附,达到去除样品中细菌内毒素的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细菌蛋白纯化样品的制备。产物可用于各种后续动物和细胞生物学操作。产品即到即用,性能稳定,操作方便,清除效率满意。
技术背景
内毒素(Endotoxin)是一种脂多糖(Lipopolysaccharides;LPS),革兰氏阴性细菌细胞膜的组成成分。在细菌蛋白包括融和蛋白纯化过程中,细菌裂解释放出内毒素,伴随着蛋白,严重干扰后续敏感的动物和真核细胞的实验。YIJI蛋白样品树脂法去内毒素技术融入了脂多糖特异亲和树脂,即多聚赖氨酸覆盖(polylysine
coated)和阳离子交换基团官能化(functionalized cation exchange
groups)超高交联聚苯乙烯聚合物(hyper-crosslinked polystyrene
polymers),充分有效地使样品中的内毒素过滤和清除达10微克/毫升,即2500至5000
EU/毫升。避免层析法的非特异性蛋白结合、免疫活性损失、和部分去内毒素失效以及昂贵的缺点。
产品内容
YIJI亲和液(Reagent A) 3毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里,有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管:用于样品操作的容器
微型台式离心机:用于沉淀亲和树脂
涡旋震荡仪:用于混匀反应物
平式摇荡仪:用于混匀反应物
实验步骤
实验开始前,从-70℃冰箱里取出待测蛋白样品,置于冰槽里融化。然后进行下列操作。
加入1毫升蛋白悬液(1至5毫克蛋白总量)到1.5毫升离心管
小心移取150微升YIJI亲和液(Reagent A)到1.5毫升离心管
盖上盖子,涡旋震荡15秒
平放在平式摇荡仪上,在4℃下孵育3小时至16小时,速度为100RPM
放进微型台式离心机离心5分钟,速度为500g(或2000RPM,例如eppendorf 5415D)
小心移取上清液到新的1.5毫升离心管,避免黑色小粒
即刻放进-70℃冰箱里保存
注意事项
本产品为20次操作
本产品采用特殊树脂法
使用1毫升枪头,将枪头尖端部分剪去,用于移取YIJI亲和液(Reagent A)
YIJI亲和液(Reagent A)不能重复使用
100毫升菌液的平均内毒素含量可高达15000 EU(30微克),介于5000至50000 EU
去内毒素程度取决于样品中内毒素含量、样品性质(细菌来源、融合蛋白特性)和溶液状况(pH、盐离子强度等),可以通过多次处理,达到彻底清除的效果;如果效果不甚理想,建议使用YIJI蛋白样品液相法去内毒素试剂盒-YIJI30046.2
经过本产品处理后的产物含有90%的蛋白成分以及100%的免疫源性
本公司提供系列内毒素处理试剂产品
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