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蛋白样品沉淀法去内毒素试剂盒使用说明

2020.5.05

主要用途

YIJI蛋白样品沉淀法去内毒素试剂是一种旨在通过特殊多肽化合物溶液结合脂多糖类物质,达到清除

蛋白样品中混杂的内毒素分子的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明

的。其适用于各种重组蛋白制备样品以及血清样品的纯化。产物可用于各种后续动物和细胞生物学操作。

产品即到即用,性能稳定,操作方便,清除效率高。

技术背景

内毒素(Endotoxin)是一种脂多糖(Lipopolysaccharides;LPS),革兰氏阴性细菌细胞膜的组成成分。在

重组蛋白纯化过程中,细菌裂解释放出内毒素,伴随着目标蛋白,严重干扰后续实验。YIJI去内毒素

技术采用了高度电荷性的两性环脂肽化合物(amphiphilic cyclic peptidolipid)溶液,通过特异性结合脂多糖

分子的脂质A 区域(lipid A region),产生复合物,中和内毒素,充分有效地清除样品中高浓度内毒素(4000

至 40000 EU/毫升)和其它亲脂性物质,高达99%以上效率。

产品内容

YIJI去毒液(Reagent A) 毫升

产品说明书 1 份

保存方式

保存在-20℃冰箱里,避免反复冻融,有效保证6 月

用户自备

1.5 毫升离心管:用于样品操作的容器

微型台式离心机:用于沉淀分层

涡旋震荡仪:用于混匀反应物

恒温水槽:用于孵育反应物

平式摇荡仪:用于混匀反应物

实验步骤

1. 从-70℃冰箱里取出蛋白样品,置于冰槽里融化

2. 移取1 毫升蛋白样品(1 至5 毫克蛋白总量)到1.5 毫升离心管

3. 加入 微升YIJI去毒液(Reagent A

4. 涡旋震荡15 秒

5. 在 4℃条件下,置于平式摇荡仪上孵育2 小时,速度为50RPM

6. 放进微型台式离心机离心10 分钟,速度为1000g(或3500RPM,例如EPPENDORF 5415)

spacer.gif7. 小心移取上清液到新的1.5 毫升离心管

8. 保存在-70℃冰箱里备用或即刻进行后续实验

注意事项

1. 本产品为20 次操作

2. 操作时,须戴手套

3. 使用时,避免污染母液

4. YIJI去毒液(Reagent A)避免反复冻融

5. 不同样品容量的操作,建议相应调整试剂用量:样品容量与试剂用量之比为10:1

6. 如果样品中内毒素含量过高,建议重复操作

7. 血清样品采用相同操作步骤,但须无菌操作

8. 100 毫升菌液的平均内毒素含量可高达15000 EU(30 微克),介于5000 至50000 EU

9. 去内毒素程度取决于样品中内毒素含量和样品性质(细菌来源、融合蛋白特性),可以通过多次处理,

达到彻底清除的效果;如果效果不甚理想,建议使用本公司的其它相关产品

10. 经过本产品处理后的产物内毒素含量可低于0.03EU/毫升

11. 本公司提供系列内毒素处理试剂产品

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定去内毒素程度高


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