头孢羟氨苄的检查和鉴别方法
鉴别
(1)取本品适量,加水适量,超声使溶解并稀释制成每1ml中约含12.5mg的溶液,取溶液1ml,加三氯化铁试液3滴,即显棕黄色(2)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。(3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集596图)一致。
检查
结晶性取本品,依法检查(通则0981),应符合规定。酸度取本品,加水制成每1ml中含5mg的溶液,依法测则定(通则0631),pH值应为4.0~6.0。有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定供试品溶液取本品适量,精密称定,加流动相A溶解并定量稀释制成每1ml中约含头孢羟氨苄(按C16H1N23O5S计)1mg的溶液对照溶液精密量取供试品溶液1ml,置100m量瓶中,用流动相A稀释至刻度,摇匀对照品溶液(1)取a-对羟基苯甘氨酸对照品约10mg精密称定,置10m1量瓶中,加流动相A适量,超声使溶解并稀释至刻度,摇匀。对照品溶液(2)取7氨基去乙酰氧基头孢烷酸对照品约10mg,精密称定,置10ml量瓶中,加pH7.0磷酸盐缓冲液取无水磷酸氢二钠28.4g,加水800ml使溶解,用30%的磷酸溶液调节pH值至7.0,用水稀释至1000ml,混匀)适量,超声使溶解并稀释至刻度,摇匀。杂质对照品溶液精密量取对照品溶液(1)和(2)各l,置100ml量瓶中,用流动相A稀释至刻度,摇匀。系统适用性溶液杂质对照品溶液与供试品溶液(9:1)的混合溶液色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;流动相A为0.02mol/L磷酸二氢钾溶液(取磷酸二氢钾2.72g,加水o00ml使溶解,用1mol/L氢氧化钾溶液调节pH值至5.0,用水稀释至1000ml,混匀),流动相B为甲醇,按下表进行线性梯度洗脱;检测波长为220nm;进样体积20pl时间(分钟)流动相A(%)流动相B(%)7098202298系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,头孢羟氨苄峰的保留时间约为10分钟,a-对羟基苯甘氨酸峰和7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸峰间的分离度应大于5.0,7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸峰与头孢羟氨苄峰间的分离度应大于5,0,测定法精密量取供试品溶液、对照溶液与杂质对照品溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,α-对羟基苯甘氨酸和7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸按外标法以峰面积计算,均不得过1.0%;其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积(1.0%),其他各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的3倍(3.0%),小于对照溶液主峰面积0.05倍的峰忽略不计水分取本品,照水分测定法(通则0832第一法1)测定,含水分应为4.2%~6.0%。
