头孢克洛的检查和鉴别方法
鉴别
(1)照薄层色谱法(通则0502)试验。中约含2mg的溶液。对照品溶液取头孢克洛对照品适量,加水溶解并稀释制成每1ml中约含2mg的溶液。混合溶液取本品与头孢克洛对照品适量,加水溶解并稀释制成每1ml中各约含2mg的溶液色谱条件采用硅胶H薄层板[取硅胶H2.5g,加0.1%羧甲基纤维素钠溶液8ml,研磨均匀后铺板(10cm20cm),经105℃活化1小时,放入干燥器中备用],以新配制的o.1mol/L枸橼酸溶液-0.lmol/L磷酸氢二钠溶液-6.6%茚三酮的丙酮溶液(60:40:1.5)为展开剂系统适用性要求混合溶液应显单一斑点。测定法吸取上述三种溶液各2l,分别点于同一薄层板上,展开,晾干,于110℃加热15分钟。结果判定供试品溶液所显主斑点的位置和颜色应与对照品溶液主斑点的位置和颜色相同。(2)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致(3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集720图)一致以上(1)、(2)两项可选做一项
检查
酸度取本品,加水制成每1ml中约含25mg的混悬液,依法测定(通则0631),pH值应为3.0~4.5有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品约50mg,置10ml量瓶中,加0.27%磷酸二氢钠溶液(pH2.5)溶解并稀释至刻度,摇匀。对照溶液精密量取供试品溶液1ml,置100ml量瓶中,用0.27%磷酸二氢钠溶液(pH2.5)稀释至刻度,摇匀系统适用性溶液取头孢克洛对照品和头孢克洛a3-异构体对照品各适量,加0.27%磷酸二氢钠溶液(pH2.5)溶解并稀释制成每1ml中各约含25g和50g的混合溶液。色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;流动相A为0.78%磷酸二氢钠溶液(取磷酸二氢钠7.8g,加水溶解并稀释至1000m1,用磷酸调节pH值至4.0),流动相B为0.78%磷酸二氢钠溶液(pH4.0)-乙腈(55:45);按下表进行线性梯度洗脱;检测波长为220nm;进样体积20l时间(分钟流动相A(%)流动相B(%)95505系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,头孢克洛峰的保留时间约为23分钟,头孢克洛峰与头孢克洛δ-3-异构体峰之间的分离度应不小于2.0,头孢克洛峰的拖尾因子应测定法精密量取供试品溶液与对照溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍(0.5%),各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的2倍(2.0%),小于对照溶液主峰面积0.1倍的峰忽略不计。残留溶剂照残留溶剂测定法(通则0861第二法)测定内标溶液取正丙醇适量,用0.2mol/L氢氧化钠溶液定量稀释制成每1ml中含20Hg的溶液供试品溶液取本品约0.2g,精密称定,置顶空瓶中,精密加内标溶液5ml溶解,密封。对照品溶液取二氯甲烷适量,精密称定,用内标溶液定量稀释制成每1ml中约含二氯甲烷20μg的溶液,精密量取5ml,置顶空瓶中。色谱条件以聚乙二醇(PEG20M)(或极性相近)为固定液的毛细管柱为色谱柱;柱温为60℃;进样口温度为120℃;检测器温度为150℃;顶空瓶平衡温度为80℃,平衡时间为20分钟。系统适用性要求对照品溶液色谱图中,二氯甲烷峰和正丙醇峰间的分离度应大于2.0。测定法取供试品溶液与对照品溶液分别顶空进样,记录色谱图。限度按内标法以峰面积比值计算,二氯甲烷的残留量应符合规定水分取本品,照水分测定法(通则0832第一法1)测定含水分应为3.0%~6.5%。重金属取本品1.0g,依法测定(通则0821第二法),含重金属不得过百万分之三十。
