(E50)牛奶抗生素检测试剂操作规范
一．操作步骤
1. 用美工刀切割试剂单孔，先纵向割开一条(8个)，再横向割一个或两个、三个……(沿两孔之间缝隙割)。
2. 取出割好的检测单孔，做好相应样品标记(可以在侧面用细水笔标记数字)，揭开密封铝箔。
3. 使用取样枪按样品顺序吸取各样品(50μl)，加到相应单孔中。注意：每个取样头对应一个样品，用过的取样头扔掉。
4．全部样品添加完毕后，剪取相应密封条对检测单孔进行密封。(密封条已经对应单条截好，只需用手撕取，检测量不到一条8个的，再对应用剪刀剪取)。
5．将密封后的检测单孔放入水浴锅或者恒温培养器内进行培养，培养时间2小时30分钟左右。
6．取出培养后的检测，从侧面观测单孔颜色，记录检测结果。
注：结果判读
黄色到浅黄绿色包括绿色为阴性结果范围
蓝绿色到紫色为阳性结果范围
7.为了保证每次检测的准确性以及找到错误结果的原因，每次检测建议做一个阴性对照(用无抗奶作为阴性对照)，如果有条件同时也可以做一个阳性对照(10ppb的青霉素样品作为阳性对照，为了确保试剂是否正常)。
二．试剂保存
1．保存温度： 4-12℃ (一般冰箱的保鲜柜即可满足保存条件)
2．避光保存：本产品对阳光敏感，一般不要长时间暴露在阳光下，或者灯光下。
注：试剂不可冷冻保存，经过冷冻的试剂内部成分将被破坏；试剂及样品要恢复到室温后才可开始检测操作，但是需要把剩余的检测小孔马上放回冰箱，以免重复多次后影响试剂的性能。
三． 注意点
1．培养的工具，可以使用恒温水浴锅，或者生化培养箱，温度必须严格控制在65℃±1℃，超过此温度条件，检测结果会受到影响，严重的就会有假阳性和假阴性结果出现。
2.每板未使用完的试剂一定要马上要放回盒子里面，并在冰箱保存，注意要用原来的塑料袋继续封好。另外不要把已经撕开的小孔或者不小心弄破铝薄纸的小孔继续放回冰箱待用，如果不小心弄破小孔后要用粘胶纸封好，并且在最快时间内使用完。
3.在使用恒温水浴锅时，把加好样品后的检测小孔用配备的粘胶纸密封完全，以避免因为受热而进水。另外，把试剂孔放在框板里面，然后慢慢地放入水浴锅内，使之漂浮在水面上。不要把框板整个放入水面以下，这样会使胶纸粘性失效或者降低，使水气或者水进入小孔内，使检测结果发生偏差。
4.加样枪的使用，加样枪有两个档位，以第一个为准，轻轻往下按直到需要用较大力往下按为止，这个为一档。要求一挡吸取牛奶样品，二档添加牛奶样品，这样保证加样量达到50ul。50ul的容量大概是牛奶样品占用了大概2mm左右的高度，或者大概是2滴半加样枪的量，如果超过这个高度，很可能是加样枪使用错误或者加样枪已经不准确。
5.定期要对水浴锅的温度进行测量(最好连续观察30分钟，确定温度是否还能在正常工作范围内)，以保证实验的准确性。如果用恒温培养箱做也需要做温度的确认，不能超过规定范围。专用的FX加热器不需要做温度确认。
6.刚挤下来的牛奶不能直接检测，需要把牛奶先放在冰箱冷藏室1-2个小时后再开始检测，刚挤下的热牛奶含有很多的抑制微生物的成分，影响检测结果出现假阳性。
7．样品的PH值要求是和原料奶的PH值一样，即6.6左右。如果PH值过高或过低都可能引起错误的结果，PH值过高则导致假阳性结果，PH值过低则导致假阴性结果。所以在每次检测之前先测一下样品的PH值。
8.如果加样后，牛奶样渗透到小孔底部(底部厚厚的一层白色)或者这个小孔侧面都有白色的奶样，证明试剂曾经经历过非常低温度状态(2℃以下的温度)，对于这种检测小孔建议再做一次检测来确认结果。
ECLIPSE50简称E50，是由西班牙引入中国的，并作为国标第二法被纳入乳品的法规。根据以前法规很难或者很长时间才改变的事实，从而可以认定它必将是个长期执行的法规。E50使用的是微生物抑制法，试剂中的杆菌是在65.0℃生长最快的，其他温度都会降低杆菌的生长速度，如果实验者使用了温度不能恒定的水浴锅和培养箱，从而导致客户在最佳培养时间时不能判读结果。
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