CIK/DC-CIK及其在细胞治疗上的应用（五）
5. 高效CIK血样本采集注意事项
（一）采血前，患者可以饮温开水、低脂清淡饮食；
（二）采血前，不可以进行任何输液治疗；
（三）采血前1天，患者不可以进行可能损伤、破坏淋巴细胞的治疗和检查项目，如放疗、化疗、核医学检查等；
（四）连续两个疗程治疗时，取血和回输细胞在时间上会有交叉，取血必须在细胞回输之前；
（五）3天内的血常规，要求白细胞在正常范围，淋巴细胞绝对值大于0.8×109/L；
（六)采血量取决于患者淋巴细胞绝对数，采血量ml×淋巴细胞计数>0.8×109/L，约为20-100ml；
（七）如需冻存细胞，采血量需要增加；
（八）血标本采集后，置入4～8℃无菌运转箱由专人及时送至实验室，一般标本放置时间不能超过4h。
6.高效CIK回输护理
（一）心理护理，如客观讲解CIK的疗效及可能出现的副作用，消除患者及家属的疑惑和恐惧心理，取得配合。细胞治疗作为一种新疗法给肿瘤患者带来希望，但其疗效存在个体差异，应让患者和家属充分知情，可避免患者因不能达到预期的疗效而出现心理落差；
（二）确定回输时间，通知患者，根据治疗需要合理安排回输工作；
（三）CIK细胞送到病房，护士应与实验员核对病人姓名、住院号、CIK编号、制备日期、回输日期、包装是否完整、细胞质量检测结果等；
（四）经外周静脉给患者回输，严格无菌操作，注意调节滴速，先慢后快；同时注意密切观察患者的一般情况，如体温、脉搏、呼吸、血压等，输注细胞前后均使用生理盐水冲管；
（五）输注过程中，密切巡视，5～10min轻轻挤压传输袋底部，使沉淀细胞重新悬浮，以免细胞沉淀聚集；
（六）副作用的观察及护理
1）发热，CIK最常见副作用为发热，常在回输后1-2h内发生，也有病人在回输4h之后发生发热反应。发生发热反应首先向医生汇报。一般情况，低、中度发热时可不作特殊处理，嘱患者多饮水；高热时按医嘱冰敷等物理降温或口服退热药物；患者寒战时注意观察病情变化，做好保暖，必要时给予吸氧；
2）变态反应，患者出现皮疹、呼吸困难、心悸等反应，临床上极少见此类反应，若出现变态反应立即停止输注，通知医生，给予吸氧、抗过敏处理；
（七）回输完毕，嘱门诊病人常规留观30min, 如有不适及时告知护士；嘱患者离院后如有病情变化，及时复诊；
（八）观察记录病人情况，填写细胞回输护理记录单。
7. 高效CIK回输注意事项
（一）输注细胞前必须经过两人核对无误，方可输入；
（二）认真检查细胞质量，查看细胞检测报告；
（三）使用一次性输血管，禁止使用带精密过滤器的输液管；使用7号或以上的头皮针，避免小针头产生的剪切力对细胞的损害；
（四）禁止在细胞内加入其它药物；
（五）注意输注速度，起始速度30～40滴/min，观察10min后如没有特殊反应，将滴速改为60～80滴/min，40～60分钟内输完；
（六）细胞培养后要及时回输，需要保存时必须放冰箱2～8℃保存不超过8h；
（七）放疗、化疗前后需间隔48小时以上方可进行细胞回输，防止放疗、化疗杀伤CIK细胞，影响疗效。
二、DC-CIK
随着细胞制备技术的日趋完善，DC-CIK细胞过继免疫治疗在临床逐渐开展，相关报道可见。实验研究方面，Marten实验研究表明：DC和CIK共培养可以同时促进CIK细胞和DC细胞的增殖和免疫功能。张嵩等的动物实验研究表明：化疗后应用DC-CIK细胞可有效抑制肿瘤细胞生长，甚至使肿瘤完全消失；而且DC-CIK细胞的抗肿瘤效应对集体免疫系统功能不产生危害，在当前对肿瘤特异性抗原了解相对较少的情况下，应用DC-CIK细胞作为肿瘤放化疗和手术后的辅助治疗有重要的临床意义。
1. 在白血病中的应用
赵春华等研究表明：与DC共培养可使CIK细胞获得更高的增殖速率和更强的体内外抗肿瘤活性，DC-CIK细胞可以作为一种临床有效的抗白血病免疫治疗策略。童春容等临床研究显示：DC-CIK细胞治疗具有明显清除微小残留白血病细胞防止复发的作用，并且静脉输注安全。
2. 在肿瘤中的应用
将CIK细胞和同源DC细胞共培养后即可获得DC-CIK细胞。它既可促进DC细胞的成熟，更能促进ClK的增殖，并加强其抗肿瘤活性。DC细胞是机体免疫应答的始动者，能够诱导持久有力的特异性抗肿瘤免疫反应；CIK细胞可通过非特异性免疫杀伤作用清除肿瘤患者体内微小残余病灶，所以负载肿瘤抗原的DC与CIK的有机结合（即DC-CIK细胞）能产生特异性和非特异性的双重抗肿瘤效应。
三、DC治疗对肿瘤治疗的原理
①DC可以高表达MHC-Ⅰ类和MHC-Ⅱ类分子，MHC分子与其捕获加工的肿瘤抗原结合，形成肽-MHC分子复合物，并递呈给T细胞，从而启动MHC-I类限制性CTL反应和MHC-Ⅱ类限制性的CD4+
Thl反应。同时，DC还通过其高表达的共刺激分子(CD80/B7-1、CD86/B7-2、CD40等)提供T细胞活化所必须的第二信号，启动了免疫应答。
②DC与T细胞结合可大量分泌IL-12、IL-18激活T细胞增殖，诱导CTL生成，主导Th1型免疫应答，利于肿瘤清除；激活穿孔素P颗粒酶B和FasL/Fas介导的途径增强NK细胞毒作用；
③DC分泌趋化因子(Chemotactic
Cytokines，
CCK)专一趋化初始型T细胞促进T细胞聚集，增强了T细胞的激发。保持效应T细胞在肿瘤部位长期存在，可能通过释放某些抗血管生成物质(如IL-12、IFN-γ)及前血管生成因子而影响肿瘤血管的形成。上述CCK进一步以正反馈旁分泌的方式活化DC，上调IL-12及CD80、CD86的表达；同时DC也直接向CD8+T细胞呈递抗原肽，在活化的CD4+
T细胞辅助下使CD8+ T细胞活化，CD4+和CD8+T细胞还可以进一步通过分泌细胞因子或直接杀伤，增强机体抗肿瘤免疫应答。
