BHT测定抗氧化剂
为了提高油脂的稳定性，防止酸败，延长保质期,近几年来国内已开始在食用油中添加抗氧化剂，由于抗氧化剂BH、PG对热稳定性较差，而BHT的热稳定性较好，能适应精练油的全过程，所以在食用油中添加抗氧化剂BHT。
1.比色法原理
油脂中的抗氧化剂BHT经水蒸气蒸馏法将BHT从油脂中分离出来，其蒸馏液将BHT从油脂中分离出来，其馏出物经冷凝后溶于甲醇中，遇邻联二茴香胺，亚硝酸钠试剂，生成橙红色物质，用氯仿萃取后的深红色溶液在520nm处比色测E。
3. 标准曲线的绘制
取6个用黑布扎的60ml分液漏斗,分别吸BHT标准溶液5μg/ml 于60ml分液漏斗中→加50%甲醇溶液至25ml→ 加邻联二茴香胺溶液5ml→摇匀→加0。3%亚硝酸钠2ml→摇1分钟→放置10分钟→加氯仿10ml→摇1分钟→分层后→将下层氯仿放入黑纸包扎的10ml比色管→520nm测E→绘制标准曲线
3.样品处理
将油脂样5g→于500ml蒸馏瓶→加无水CaCL2 16克→水10ml→当温度达到165℃→连接好水蒸气装置→用50ml甲醇的容量瓶接收（最好是200ml）→收集馏液为100ml(共计150 ml)→用热甲醇（40-50℃）分次洗涤冷凝管→合并于容量瓶→用甲醇定容200ml
4. 测定
吸馏液25ml→于黑布包扎的60ml分液漏斗→加邻联二茴香胺溶液5ml→摇匀→加0.3%亚硝酸钠
2ml→摇匀1分钟→放10分钟→加10ml氯仿→振摇1分钟→分层后→将氯仿液放入黑纸包扎的10ml
比色管→520nm下测E
5. 计算
BHT(mg/kg)=V/W*C/V1
W----样品重量(g)
V----样品定容体积(ml)
V1------测定时所用的提取液体积（ml）
C-------相当于标准浓度(μg)
6. 注意事项：
(1) 控制蒸气后不要太高，以免油滴带出，影响测定结果
（2）蒸馏结束后，用热的甲醇淋洗弯管以及冷凝管必须少量多次，以免冲洗不干净，影响结果偏低。
（3）加入显色剂后的反应时间以5—7分钟显色到达最高峰10分钟之内保持恒定，然后逐渐褪色，所以必须静置10分钟，然后立即加氯仿萃取。
（4）氯仿萃取后，放于暗处1小时，如果暴露于光线中会很快褪色。
（5）所生成的有色物，对光具有敏感性，在暗处内操作最好
