应用Target MS2 方法对大鼠血浆中人重组干扰素进...（三）
3.2 标准曲线绘制
人重组干扰素α-2b 酶解的标准肽段稀释成以下几个浓度：104ng/ml，103ng/ml，102ng/ml，101ng/ml，100ng/ml，10-2ng/ml，各自吸样8ul， 与10ul 空白血浆酶解的肽段样本混匀，上样18ul，质谱检测，检测方法使用TargetMS2，inclusion list 为m/z 451.75，isolation window 为4 m/z。对子离子458.31 进行抽提，结果见下图。
从上图可以看出，所有6 个浓度的标准品均在36min 左右有一个色谱洗脱峰出现，与上述标准品的洗脱时间一致，该色谱峰为451.75-458.31 母离子- 子离子对的色谱峰，即EDSILAVR 的洗脱峰，分别对各个色谱峰的峰面积（即上图中色谱峰上显示的MA 数值）进行积分，结果见下述表格。
从上述结果中可以看出，在6 个数量级的浓度范围内，浓度与峰面积的线性相关系数在0.99 以上，说明Q-Exactive的检测动态范围足够大，可以很好的应用于蛋白质药物代谢动力学研究。
3.3 大鼠血浆样本中人重组干扰素α-2b 浓度的测定
大鼠血浆样本上样18ul，质谱检测，原始结果见下图，图中可见在35.33min 有一个明显的色谱洗脱峰出现，洗脱时间与上述的标准品的洗脱时间相一致，为血浆样本中的人重组干扰素α-2b 的肽段EDSILAVR 的洗脱峰，对m/z 458.31 这一子离子的面积进行积分。
峰面积为9787, 代入上述的标准曲线中进行计算，得出原始血浆中人重组干扰素α-2b 浓度为26.9185 ng/ml。
4 总结
综上所述，Q-Exactive 拥有超高的灵敏度，在不到500ng 上样量的情况下对人重组干扰素α-2b 的氨基酸序列匹配度达到了98.2%；Q-Exactive 拥有足够高的动态范围，在对人重组干扰素α-2b 的标准品检测中，其动态范围达到了6个数量级，并且线性相关系数达到了0.99 以上。简而言之，Q-Exactive 的超高性能可以很好的应用于大分子药物代谢的研究中去。
