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实验室分析方法--液相色谱法的基本原理

2022.1.27

色谱法作为一种分离方法,利用物质在两相中吸附或分配系数的微小差异达到分离的目的。当两相作相对移动时,被测物质在两相之间进行反复多次的质量交换,使原来微小的性质差异产生放大的效果,达到分离、分析样品组成及测定样品的一些物理化学参数的目的。色谱法的最大特点在于能将复杂的混合物样品中的相关组分逐一分离后,再分别进行检测。因此与其他分析化学方法相比较,色谱法具有准确性高、分析选择性好的特征。


液相色谱过程中,组分在相对运动、不相混落的两相互交换,其中相对静止的一相被称为固定相,而另一相对运动的相被称为流动相。不同组分在两相间的吸附、分配、离子交换、亲和力或分子尺寸等性质存在微小差别,经过连续多次的交换,这种性质的微小差别被叠加、放大,最终得到分离。不同组分性质上的微小差别是色谱分离的根本,即必要条件;而性质上有微小差别的组分之所以得以分离,是因为它们在两相之间进行了上干次其至上百万次的质量交换,这是色谱分离的充分条件。


液相色谱与气相色谱相比,其最大特点是可以分离不可挥发或受热后不稳定的物质,而这类物质在已知化合物中占有相当大的比例。显然,液相色谱不仅兼具色谱法独有的高效、快速、灵敏的特征,也具有更为广阔的应用空间。近来,液相色谱在生命科学、环境科学等领域中显示出突出的作用,分析、分离和纯化生物大分子物质的研究极为活跃;而离开液相色谱,对复杂环境样品的分析检测将不可能实现。手性分子的分离和分析是液相色谱的重要对象,手性分离在制药领域已被广泛应用。色谱的重要性首先在于它使性质上非常接近的物质的分离测定成为可能,这正是近代化学、生物学研究中一个极为重要和不可缺少的手段。


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